本發(fā)明屬于白酒分析檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種快速檢測(cè)白酒中丙烯醛的方法。
背景技術(shù)：
：丙烯醛于1995被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（iarc）確認(rèn)為第iii類(lèi)致癌物，即可能對(duì)人致癌的物質(zhì)。丙烯醛對(duì)活體細(xì)胞有毒害作用，揮發(fā)性強(qiáng)，吸入容易引起眼痛、流淚、頭痛、咳嗽、頭暈和呼吸困難等癥狀，會(huì)損害呼吸道粘膜，危害肺部健康。世界衛(wèi)生組織（who）規(guī)定了丙烯醛每人每天允許的攝入量為7.5μg/kg。丙烯醛易溶于水、醇和丙酮等多種有機(jī)溶劑，國(guó)外已在啤酒、葡萄酒、水果蒸餾酒、龍舌蘭酒、皮渣白蘭地和威士忌中檢測(cè)到。白酒產(chǎn)量的攀升，以及消費(fèi)者對(duì)于白酒的安全問(wèn)題越來(lái)越重視，這使得對(duì)白酒中有害化合物的研究變得格外重要。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于白酒中丙烯醛的研究很少，對(duì)丙烯醛的檢測(cè)方法，主要有：1、氣相色譜法（gc-fid）：目前白酒分析多使用氣相色譜結(jié)合質(zhì)譜，氣相色譜分析的物質(zhì)大多是揮發(fā)性組分。丙烯醛經(jīng)衍生化試劑衍生后與醇、酯等化合物分離，用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行氣相色譜分析。缺點(diǎn)是處理時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)限高。2、高效液相色譜法（hplc-uv）：適合分析難氣化、不易揮發(fā)的物質(zhì)，所以液相色譜多用于檢測(cè)白酒中一些安全指標(biāo)物質(zhì)。利用2,4-二硝基苯肼使醛生成2,4-二硝基苯腙衍生物，再經(jīng)溶劑洗脫，使之與其他化合物分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)。缺點(diǎn)是檢測(cè)限高。本發(fā)明所用柱前衍生結(jié)合hs-spme-gc-ms技術(shù)，只需對(duì)白酒進(jìn)行簡(jiǎn)單的稀釋處理和衍生后就可快速準(zhǔn)確的對(duì)丙烯醛進(jìn)行定量。由于丙烯醛本身具有毒性，who規(guī)定了丙烯醛的容許濃度1500μg/l，為了廣大消費(fèi)者的健康考慮，建立一套快速定量白酒中丙烯醛的檢測(cè)方法勢(shì)在必行。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，而提出的一種基于道路標(biāo)線(xiàn)的駕駛疲勞預(yù)警方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：一種快速檢測(cè)白酒中丙烯醛的方法，其特征在于利用柱前衍生與頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)快速檢測(cè)白酒中丙烯醛的方法，其具體步驟為：（1）通過(guò)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)丙烯醛衍生物來(lái)確定其特征離子，并建立頂空固相微萃取與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用,其具體步驟為：a、用煮沸并冷卻至室溫的超純水配制1000mg/l的丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液作為最高濃度，用超純水將其稀釋至10mg/l作為丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)使用液；b、使用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀來(lái)檢測(cè)丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，頂空固相微萃取條件：萃取頭為dvb/car/pdms三相萃取頭，預(yù)熱10min，溫度65℃，萃取時(shí)間為45min，萃取溫度65℃，gc解吸附時(shí)間為5min；gc條件：載氣為純度為99.9995%的氦氣，流速2ml/min，不分流進(jìn)樣模式；色譜柱：ffap的規(guī)格為60m×0.25mm×0.25μm，進(jìn)樣口溫度250℃；升溫程序：50℃保持2min，以20℃/min升至100℃，保持0.1min，以5℃/min升至180℃，保持1min，以4℃/min升至200℃，保持0.1min，以20℃/min升至230℃，保持10min；scan模式掃描范圍：35~350amu；c、根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，丙烯醛衍生物特征離子為m/z251，內(nèi)標(biāo)衍生物d16-辛醛的特征離子為m/z243；（2）柱前衍生頂空固相微萃取與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)白酒中的丙烯醛定性檢測(cè)，其具體步驟為：用煮沸冷卻至室溫的超純水將酒樣稀釋至酒精度10%vol，準(zhǔn)確吸取8ml于20ml頂空瓶中，加入3gnacl，加入10μl內(nèi)標(biāo)d16-辛醛溶液，其終濃度為1.32μg/l，最后加入300μl衍生劑pfbha溶液，旋緊瓶蓋，進(jìn)行頂空固相微萃取與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法分析；（3）制作丙烯醛定量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)白酒中的丙烯醛進(jìn)行準(zhǔn)確定量，其具體步驟為：d、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作：將10mg/l丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)使用液梯度稀釋成一系列標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別吸取8ml標(biāo)準(zhǔn)使用液到不同的頂空瓶中，加入3gnacl，再加入10μl內(nèi)標(biāo)d16-辛醛溶液，最后加入300μl衍生劑pfbha溶液，旋緊瓶蓋，進(jìn)行hs-spme-gc-ms分析，采用選擇離子法計(jì)算丙烯醛衍生物的峰面積，其中丙烯醛衍生物特征離子為m/z251，內(nèi)標(biāo)衍生物d16-辛醛的特征離子為m/z243。以丙烯醛衍生物峰面積與內(nèi)標(biāo)衍生物峰面積之比為橫坐標(biāo)，以丙烯醛衍生物的質(zhì)量濃度與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度之比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；e、白酒預(yù)處理：用煮沸冷卻至室溫的超純水將酒樣稀釋至酒精度10%vol；f、白酒中丙烯醛的定量分析：準(zhǔn)確吸取酒樣稀釋液8ml于20ml頂空瓶中，加入3gnacl，加入10μl內(nèi)標(biāo)d16-辛醛溶液，最后加入300μl衍生劑pfbha溶液，旋緊瓶蓋，進(jìn)行頂空固相微萃取與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法分析，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行定量。本發(fā)明有益效果：本發(fā)明使用pfbha與白酒中的丙烯醛反應(yīng)生成肟，通過(guò)hs-spme-gc-ms聯(lián)用技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)白酒中丙烯醛的準(zhǔn)確定量。本發(fā)明建立了一種全新的快速檢測(cè)丙烯醛的方法，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)靈敏且自動(dòng)化程度高，特異性高，檢測(cè)限低，回收率較高。附圖說(shuō)明圖1丙烯醛衍生物色譜圖；圖2丙烯醛衍生物質(zhì)譜圖；圖3柱前衍生與hs-spme-gc-ms法聯(lián)用檢測(cè)白酒中的丙烯醛；圖4柱前衍生與hs-spme-gc-ms法聯(lián)用定量丙烯醛的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。實(shí)施例1：不同香型成品白酒中丙烯醛的定性和定量（1）通過(guò)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（gc6890n-msd5975）檢測(cè)丙烯醛衍生物來(lái)確定其特征離子并建立hs-spme-gc-ms方法：a、用煮沸并冷卻至室溫的超純水配制1000mg/l的丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液作為最高濃度，用超純水將其稀釋至10mg/l作為丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)使用液。b、使用hs-spme-gc-ms檢測(cè)丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，頂空固相微萃取條件：萃取頭為dvb/car/pdms三相萃取頭，預(yù)熱10min，溫度65℃，萃取時(shí)間為45min，萃取溫度65℃，gc解吸附時(shí)間為5min；gc條件：載氣為氦氣（he，純度99.9995%），流速2ml/min，不分流進(jìn)樣模式；色譜柱：ffap（60m×0.25mm×0.25μm），進(jìn)樣口溫度250℃。升溫程序：50℃保持2min，以20℃/min升至100℃，保持0.1min，以5℃/min升至180℃，保持1min，以4℃/min升至200℃，保持0.1min，以20℃/min升至230℃，保持10min；scan模式掃描范圍：35~350amu。檢測(cè)結(jié)果如圖1和圖2所示（雙峰）。c、根據(jù)圖1和圖2，丙烯醛衍生物特征離子為m/z251。（2）柱前衍生hs-spme-gc-ms法對(duì)白酒中的丙烯醛定性檢測(cè)：用煮沸冷卻至室溫的超純水將酒樣稀釋至酒精度10%vol，準(zhǔn)確吸取8ml于20ml頂空瓶中，加入3gnacl，加入10μl內(nèi)標(biāo)d16-辛醛溶液（最終濃度為1.32μg/l）。最后加入300μl衍生劑pfbha溶液，旋緊瓶蓋。進(jìn)行hs-spme-gc-ms分析，結(jié)果如圖3所示。（3）制作丙烯醛定量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)不同香型成品白酒中的丙烯醛進(jìn)行準(zhǔn)確定量：d、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作：將10mg/l丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)使用液梯度稀釋成一系列標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別吸取8ml標(biāo)準(zhǔn)使用液到不同的頂空瓶中，加入3gnacl，加入10μl內(nèi)標(biāo)d16-辛醛溶液（終濃度為1.32μg/l），最后加入300μl衍生劑pfbha溶液，旋緊瓶蓋，進(jìn)行hs-spme-gc-ms分析。以丙烯醛衍生物峰面積與內(nèi)標(biāo)衍生物峰面積之比為橫坐標(biāo)，以丙烯醛衍生物的質(zhì)量濃度與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度之比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖4所示。e、供試樣品的準(zhǔn)備：采集濃香型、醬香型、清香型、豉香型、鳳香型、芝麻香型、老白干香型和特香型的成品酒，共36種成品酒。f、不同香型成品白酒預(yù)處理：將酒樣用煮沸冷卻至室溫的超純水稀釋至酒精度為10%vol。g、成品白酒中丙烯醛的定量分析：使用柱前衍生結(jié)合hs-spme-gc-ms方法檢測(cè)樣品，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行定量，檢測(cè)結(jié)果如表1所示。（4）定量成品白酒中丙烯醛方法的評(píng)價(jià)：通過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)分析圖表可知，該方法對(duì)于定量丙烯醛有很寬的線(xiàn)性范圍，而且在線(xiàn)性范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系很好（r2>0.99），可見(jiàn)該方法的適用范圍比較廣。在成品酒中添加相似濃度的丙烯醛標(biāo)準(zhǔn)品，計(jì)算丙烯醛定量方法的回收率，并通過(guò)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)考察該定量方法的精確性，具體如表2所示。該方法定量丙烯醛的下限（0.0610μg/l）低于樣品中丙烯醛的含量，可以采用此方法對(duì)白酒中的丙烯醛進(jìn)行定量，且該方法表現(xiàn)出很好的準(zhǔn)確性（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.21%~3.29%之間）和精確性（回收率在92%~93%之間），完全能夠滿(mǎn)足白酒中丙烯醛的定量檢測(cè)。表1不同香型白酒中丙烯醛的含量表2丙烯醛定量方法的回收率和精確性（n=3）添加濃度（μg/l）1100200rsd（%）3.173.292.21回收率（%）939293以上，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12