技術(shù)特征：

1.一種用于原代神經(jīng)元細胞的高爾基染色方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟3)中，蛋黃的作用時間為5min～60min，作用溫度為10℃～30℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟3)中，所述高爾基染色液的作用時間為0.5h～72h，作用溫度為4℃～80℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟2)中，所述固定液選自：1％～12.5％戊二醛、2％～10％多聚甲醛、5％～10％福爾馬林或10％～100％乙醇。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟2)中，所述固定液的固定時間為：10～60min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟4)中，所述還原劑選自：10％～30％的氨水水溶液或1～10％的氫氧化鋰水溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟5)中，所述同步輻射x-ray成像的能量為280ev～20kev。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟5)中，所述同步輻射x-ray成像的分辨率為10nm～1000nm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高爾基染色方法，其特征在于，步驟1)中，所述動物腦組織包括：sd鼠腦組織、c57bl/6小鼠腦組織或balb/c小鼠腦組織。

10.一種根據(jù)權(quán)利要求1～9中任意一項所述的高爾基染色方法在神經(jīng)科學領(lǐng)域中的應用，采用所述高爾基染色方法可實現(xiàn)對原代神經(jīng)元細胞快速的、高分辨率的、完整三維結(jié)構(gòu)的成像。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種用于原代神經(jīng)元細胞的高爾基染色方法及其應用，包括以下步驟：1)提取和培養(yǎng)原代神經(jīng)元細胞；2)使用固定液對原代神經(jīng)元細胞進行固定；3)將蛋黃均勻地覆蓋在細胞表面，一段時間后，將蛋黃吸棄，添加高爾基染色液，對固定的原代神經(jīng)元細胞進行染色；4)去除高爾基染色液，使用還原劑進行反應；以及5)光學顯微鏡成像觀察和/或同步輻射X?ray成像觀察。本發(fā)明成功對原代神經(jīng)元細胞進行染色，并且在同步輻射X?ray成像技術(shù)下可以觀察到神經(jīng)元樹突和形態(tài)，為進一步利用同步輻射X?ray研究神經(jīng)元完整三維結(jié)構(gòu)以及神經(jīng)元的完整三維精細結(jié)構(gòu)奠定了良好的研究基礎(chǔ)，這將促進人類對神經(jīng)系統(tǒng)信息交流的認識和理解。

技術(shù)研發(fā)人員：蔡小青,周峰,王麗華,張瑜,諸穎,胡鈞,樊春海
受保護的技術(shù)使用者：中國科學院上海高等研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9