2和柱塞3構(gòu)成的空腔以用于盛放生物試劑溶液。
[0086]實施例5
[0087]本實施例使用了施例4中描述的裝置。約Ing的5種不同的鼠單抗(圖5A和5B)或兔多抗(圖5C和OT)固定在硝酸纖維素膜上的形成有五個生物分子點的檢測體；這些檢測體或者用傳統(tǒng)的方法與HRP標記的羊抗鼠/羊抗兔結(jié)合(圖5A和5C)，或用本發(fā)明的方法，使用施例4中描述的裝置，與HRP標記的羊抗鼠/羊抗兔結(jié)合(圖5B和5D)。如圖所示，本發(fā)明的方法產(chǎn)生的信號比(5B和5D)傳統(tǒng)的方法產(chǎn)生的信號(5A和5C)要強幾倍。傳統(tǒng)的方法需1-2個小時來完成，本發(fā)明的方法在10分鐘內(nèi)完成。
[0088]實施例6
[0089]如圖4所示，一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，包括檢測體1、柱缸2、柱塞3和密封結(jié)構(gòu)4，檢測體I的兩側(cè)設(shè)有襯托為檢測體I提供剛性支持，本實施例中的襯托為濾網(wǎng)，由不與溶液中的試劑發(fā)生作用的材料制成，如表面疏水處理的膜(詳見美國專利5，792，425和5，141，639);襯托可以起到緩沖區(qū)的作用，保證溶液在整個支持體上均勻分布。一般襯托上微孔的尺寸比支持體的微孔襯托大，襯托上微孔的尺寸一般為5微米到I毫米，本實施例中的微孔尺寸為100微米；襯托的厚度一般為幾微米到幾厘米，最好從0.1毫米到10毫米，本實施例的襯托厚度為0.2毫米。柱缸2為圓柱形中空結(jié)構(gòu)，柱塞3位于柱缸2的中空結(jié)構(gòu)中可做活塞運動，柱塞3與柱缸2之間設(shè)有密封結(jié)構(gòu)4，柱塞3也為中空結(jié)構(gòu)，檢測體I固定于柱塞3的一端，柱塞3的中空結(jié)構(gòu)中設(shè)有第二柱塞5，第二柱塞5與柱塞3之間設(shè)有密封結(jié)構(gòu)，第二柱塞5能在柱塞3的中空結(jié)構(gòu)中做活塞運動。由檢測體1、柱缸2和柱塞3構(gòu)成的空腔以及由檢測體1、柱塞3和第二柱塞5構(gòu)成的空腔用于盛放生物試劑溶液。
[0090]實施例7
[0091]本實施例中，首先使用凝膠電泳將含有PCT的蛋白樣品(血清)通過SDS/PAGE分離，然后將分離后的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜上形成一個蛋白印跡膜。將蛋白印跡膜作為微孔支持體。使用本發(fā)明的方法，結(jié)合過程如圖1所示，使抗體溶液在真空作用下，穿過印跡膜。在此過程中，抗體與抗原有效結(jié)合。這一過程被自動地重復(fù)多次以達到抗體-抗原的最大結(jié)合(圖7，右)。用傳統(tǒng)的方法得到的抗體-抗原結(jié)合信號相對很弱(圖7，左)。因為這個循環(huán)過程非?？焖伲梢钥s小抗體抗原反應(yīng)所需時間。清洗過程也是以這種類似過程完成，能有效地去除非特異性結(jié)合的抗體。運用抗體-抗原循環(huán)反應(yīng)技術(shù)可以將抗體-抗原結(jié)合過程從幾個小時縮短到幾分鐘，從而大大加快了蛋白質(zhì)檢測的速度?？贵w-抗原循環(huán)反應(yīng)技術(shù)保證了抗體-抗原的最大結(jié)合，從而提高了檢測的靈敏度。
【主權(quán)項】
1.一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其步驟包括: (1)將生物分子固定在帶有微孔的微孔支持體上，形成一個或多個生物分子點，得到檢測體； (2)將生物試劑通過微孔穿過微孔支持體，在此過程中，生物試劑與生物分子結(jié)合； (3)重復(fù)步驟(2)，使得生物試劑重復(fù)多次穿過微孔支持體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述微孔支持體為硝酸纖維膜或尼龍膜或聚丙烯酰胺膜或者由硝酸纖維、尼龍、聚丙烯酰胺衍生物構(gòu)成的膜。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述的檢測體為多個生物分子點固定在微孔支持體上形成的生物分子點陣。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述檢測體上至少有2個生物分子點，每一個生物分子點被固定在微孔支持體上至少一個預(yù)先確定的位置上。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述檢測體上至少有5個生物分子點，每一個生物分子點被固定在微孔支持體上至少一個預(yù)先確定的位置上。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述檢測體為蛋白質(zhì)經(jīng)過電泳分離然后轉(zhuǎn)移并固定在微孔支持體上形成的蛋白質(zhì)印跡膜。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述的生物分子為抗體或者所述的生物試劑為抗體。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述步驟(2)中生物試劑溶液以單一方向通過微孔穿過微孔支持體。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述步驟(2)中生物試劑溶液以雙向通過微孔穿過微孔支持體。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述步驟⑶中重復(fù)步驟(2)2到100次。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法，其特征在于:所述步驟⑶中重復(fù)步驟(2)5到30次。12.一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:包括檢測體(I)、柱缸(2)和柱塞(3)，所述檢測體由微孔支持體和固定在上面的生物分子形成，所述的柱缸(2)為中空結(jié)構(gòu)，所述的柱塞(3)位于柱缸(2)的中空結(jié)構(gòu)中，柱塞(3)與柱缸(2)之間形成密封結(jié)構(gòu)⑷。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的檢測體(I)為微孔支持體上固定有多個生物分子點形成的生物分子點陣，至少有2個生物分子點，每一個生物分子點被固定在微孔支持體上至少一個預(yù)先確定的位置上。14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的檢測體(I)為微孔支持體上固定有多個生物分子點形成的生物分子點陣，至少有5個生物分子點，每一個生物分子點被固定在微孔支持體上至少一個預(yù)先確定的位置上。15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的生物分子為抗體。16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的檢測體為蛋白質(zhì)經(jīng)過電泳分離然后轉(zhuǎn)移并固定在微孔支持體上形成的蛋白質(zhì)印跡膜。17.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的檢測體(I)固定于柱缸(2)的一端。18.根據(jù)權(quán)利要求12所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述的柱缸⑵為一端封閉的中空結(jié)構(gòu)，所述的柱塞⑶為中空結(jié)構(gòu)，檢測體⑴固定于柱塞⑶的一端。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述柱塞(3)的中空結(jié)構(gòu)中設(shè)有第二柱塞(5)，第二柱塞(5)與柱塞(3)之間形成密封結(jié)構(gòu)。20.根據(jù)權(quán)利要求12?19中任意一項所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:所述柱塞(3)和柱缸(2)的中空結(jié)構(gòu)為橢圓柱形。21.根據(jù)權(quán)利要求12?19中任意一項所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:柱塞(3)和柱缸(2)的中空結(jié)構(gòu)為四方柱形，四角帶有弧度。22.根據(jù)權(quán)利要求12?19中任意一項所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，其特征在于:還包括一個或多個襯托，至少一個所述的襯托設(shè)置在檢測體(I)的一側(cè)與檢測體(I)直接接觸。23.一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的多級裝置，其特征在于:將η個權(quán)利要求12?22中任意一項所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置組合得到，其中n ^ 2。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的多級裝置，其特征在于:2彡η彡384。25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的多級裝置，其特征在于:4 < η < 96。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的方法和裝置，屬于生物檢測領(lǐng)域。本發(fā)明中，生物分子被固定在微孔支持體上，生物試劑溶液循環(huán)多次通過微孔穿過支持體，在每次穿過過程中，生物試劑與生物分子快速、有效結(jié)合，重復(fù)多次穿過使得生物試劑與生物分子的結(jié)合大大加強。本發(fā)明中的一種促進生物試劑與生物分子結(jié)合的裝置，包括柱缸、柱塞、微孔支持體和固定在微孔支持體上的生物分子。柱塞在柱缸內(nèi)來回運動，促使生物試劑溶液多次反復(fù)穿過微孔支持體，促進生物試劑與生物分子的結(jié)合，與現(xiàn)有的檢測方法相比具有操作簡便、快捷、靈敏等優(yōu)點。
【IPC分類】G01N33/68, G01N33/543, G01N33/544
【公開號】CN104931711
【申請?zhí)枴緾N201510358712
【發(fā)明人】王穎劍
【申請人】馬鞍山海普微奇生物科技有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年6月25日