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【主權(quán)項(xiàng)】
I. 一種表征個(gè)體中的肝損傷的方法，所述方法包括： a. 直接或間接獲得在來自所述個(gè)體的血液樣品中的血清白蛋白的濃度值； b. 直接或間接獲得在來自所述個(gè)體的所述血液樣品中選自由以下組成的組的一種 或多種免疫分析物的濃度值：TNFa;IL-12 ;IL-17 ;IL-4 ;IL-5 ;IL-13 ;IL-9 ;MIP-10 ; RANTES;FGFb;和PDGF-bb; c. 確定步驟（a)的血清白蛋白濃度值是（i)小于或等于2. 8g/dL，還是（ii)大于2. 8g/ dL； d. 將步驟（b)的所述一種或多種免疫分析物的濃度與來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值 免疫分析物濃度進(jìn)行比較，以確定步驟（b)的所述一種或多種免疫分析物的濃度中的任一 種是否小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度；和 e. 鑒定所述個(gè)體：
1. 如果步驟（a)的血清白蛋白濃度值小于或等于2. 8g/dL，并且步驟（b)所述的一種 或多種免疫分析物的濃度中的每一種都小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃 度，則鑒定所述個(gè)體具有威脅生命的肝損傷；或 ii.如果步驟（a)的血清白蛋白濃度值大于2. 8g/dL，和/或步驟（b)的免疫分析物濃 度不都是小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度，則鑒定所述個(gè)體具有不威脅 生命的肝損傷。
2. 權(quán)利要求1的方法，其還包括開出適合所述個(gè)體的鑒定狀態(tài)的醫(yī)學(xué)護(hù)理處方。
3. 權(quán)利要求2的方法，其中開處方包括：如果所述個(gè)體被鑒定具有威脅生命的肝損傷， 則為所述個(gè)體推薦肝移植程序。
4. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的方法，其還包括：如果所述個(gè)體被鑒定具有威脅生命的肝 損傷，則對所述個(gè)體進(jìn)行肝移植的步驟。
5. 權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的方法，其中所述血液樣品是血清樣品。
6. 權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的方法，其中所述個(gè)體是人。
7. 權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括直接或間接獲得關(guān)于選自由以下 組成的組的至少三種免疫分析物的濃度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb和IL-6。
8. 權(quán)利要求7的方法，其中步驟（b)包括直接或間接獲得關(guān)于選自由以下組成的組的 四種免疫分析物的濃度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9，MIP-1 0，RANTES， FGFb，PDGF-bb和IL-6。
9. 權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括獲得關(guān)于IL-17的濃度值。
10. 權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括獲得關(guān)于RANTES的濃度值。 II. 權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括獲得關(guān)于I3DGFbb的濃度值。
12. 權(quán)利要求9-11中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括獲得關(guān)于選自由以下組成的組 的免疫分析物的濃度值：IL_4,IL-13,IL-9和FGFb。
13. 權(quán)利要求9或10的方法，其中步驟（b)包括獲得關(guān)于TNFa和FGFb的濃度值。
14. 權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)還包括獲得來自所述個(gè)體的血液樣 品中的IL-6的濃度值，其中大于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度的IL-6濃 度值與鑒定所述個(gè)體具有急性或亞急性肝損傷一致。
15. -種評估招募到臨床試驗(yàn)中的受試者中的肝損傷的方法，所述方法包括： a. 直接或間接獲得來自所述受試者的血液樣品中的血清白蛋白的濃度值； b. 直接或間接獲得來自所述受試者的血液樣品中選自由以下組成的組的一種或多種 免疫分析物的濃度值：TNFa;IL-12 ;IL-17 ;IL-4 ;IL-5 ;IL-13 ;IL-9 ;MIP-10;RANTES; FGFb;和PDGF-bb; c. 確定步驟（a)的血清白蛋白濃度值是（i)小于或等于2. 8g/dL，還是（ii)大于2. 8g/ dL； d. 將步驟（b)的所述一種或多種免疫分析物的濃度與來自健康受試者的相對應(yīng)的中 值免疫分析物濃度進(jìn)行比較，以確定步驟（b)的所述一種或多種免疫分析物的濃度中的任 一種是否小于來自健康受試者的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度；和 e. 鑒定所述受試者： i. 如果步驟（a)的血清白蛋白濃度值小于或等于2. 8g/dL，并且步驟（b)所述的一種 或多種免疫分析物的濃度中的每一種都小于來自健康受試者的相對應(yīng)的中值免疫分析物 濃度，則鑒定所述受試者具有威脅生命的肝損傷； ii. 如果步驟（a)的血清白蛋白濃度值大于2. 8g/dL，步驟（b)的免疫分析物濃度不都 是小于來自健康受試者的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度，或者二者，則鑒定所述受試者具 有不威脅生命的肝損傷；或 iii. 如果步驟（a)的血清白蛋白濃度值大于2. 8g/dL，并且步驟（b)所述的一種或多 種免疫分析物的濃度全部大于或等于來自健康受試者的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度，則 鑒定所述受試者具有正常的肝功能。
16. 權(quán)利要求15的方法，其中所述血液樣品是血清樣品。
17. 權(quán)利要求15或16的方法，其中步驟（b)包括直接或間接獲得選自由以下組成 的組中的至少三種免疫分析物的濃度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb和IL-6。
18. 權(quán)利要求15-17中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括直接或間接獲得選自由以 下組成的組的四種免疫分析物的濃度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb和IL-6。
19. 權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)的方法，其中步驟（b)包括直接或間接獲得IL-17、 RANTES、PDGF-bb和IL-9 的濃度值。
20. 權(quán)利要求15-19中任一項(xiàng)的方法，其中如果所述受試者被鑒定具有威脅生命的肝 損傷，則將所述受試者從所述臨床試驗(yàn)中去除。
21. 權(quán)利要求15-19中任一項(xiàng)的方法，其中如果所述受試者被鑒定具有不威脅生命的 肝損傷，則將所述受試者從所述臨床試驗(yàn)中去除。
22. 權(quán)利要求15的方法，其中步驟（a) - (e)在所述臨床試驗(yàn)開始時(shí)進(jìn)行，然后在所述臨 床試驗(yàn)過程中重復(fù)至少一次。
23. 權(quán)利要求22的方法，其還包括：如果在所述臨床試驗(yàn)過程中所述受試者的鑒定從 具有正常的肝功能改變?yōu)榫哂胁煌{生命或威脅生命的肝損傷，則將所述受試者從所述試 驗(yàn)中去除。
24. 權(quán)利要求22的方法，其還包括：如果在所述臨床試驗(yàn)過程中所述受試者的鑒定從 具有不威脅生命的肝損傷改變?yōu)榫哂型{生命的肝損傷，則將所述受試者從所述試驗(yàn)中去 除。
25. -種試劑盒，其包括：第一抗體，所述第一抗體適于檢測并定量選自由以下組成的 組的免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb， H)GF-bb，IL-6和血清白蛋白；和關(guān)于按照權(quán)利要求1的方法表征個(gè)體的肝損傷的使用說 明。
26. 權(quán)利要求25的試劑盒，其還包括第二、第三和第四抗體，每種抗體適于檢測選自 由以下組成的組的免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0， RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb，IL-6 和血清白蛋白。
27. 權(quán)利要求25的試劑盒，其中所述第一抗體與選自由以下組成的組的免疫分析物結(jié) 合：IL-9,IL-17,RANTES和PDGF-bb。
28. 權(quán)利要求25的試劑盒，其中所述第一、第二、第三和第四抗體檢測并定量IL-9、 IL-17、RANTES和PDGF-bb中的每一種。
29. 權(quán)利要求25的試劑盒，其中所述第一抗體連接在固體支持物上。
30. 權(quán)利要求26的試劑盒，其中所述第一、第二、第三和第四抗體連接在固體支持物 上。
31. 權(quán)利要求29或30的試劑盒，其中所述固體支持物提供多路測定，所述多路測定適 于同時(shí)檢測和定量選自由以下組成的組中的至少四種免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17， IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb和IL-6。
32. 權(quán)利要求31的試劑盒，其中所述多路測定檢測并定量IL-9、IL-17、RANTES和 F1DGFHob中的每一種。
33. 權(quán)利要求25的試劑盒，其中所述使用說明還包括列出具有健康肝臟的個(gè)體中每種 免疫分析物的中值濃度的表格。
34. -種針對接受肝移植對多名患者進(jìn)行優(yōu)先排序的方法，所述方法包括： a. 直接或間接獲得來自包括第一個(gè)體和第二個(gè)體的多個(gè)個(gè)體的各自的血液樣品中血 清白蛋白的濃度值； b. 直接或間接獲得來自包括第一個(gè)體和第二個(gè)體的多個(gè)個(gè)體的各自的血液樣品中選 自由以下組成的組的一種或多種免疫分析物的濃度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5， IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，F(xiàn)GFb，PDGF-bb和IL-6 ; c. 將與所述第一個(gè)體相關(guān)的步驟（b)所述的一種或多種免疫分析物的濃度與來自健 康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度相比較，以確定步驟（b)所述的一種或多種免疫分 析物的濃度中的任一種是否小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度； d. 將與所述第二個(gè)體相關(guān)的步驟（b)所述的一種或多種免疫分析物的濃度與來自健 康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度相比較，以確定步驟（b)所述的一種或多種免疫分 析物的濃度中的任一種是否小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的中值免疫分析物濃度； e. 確定（i)所述第一個(gè)體具有大于2. 8g/dL的步驟（a)的血清白蛋白濃度值，或（ii) 步驟（b)所述的一種或多種免疫分析物的濃度中的任一種小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的 中值免疫分析物濃度； f. 確定（i)所述第二個(gè)體具有小于或等于2. 8g/dL的步驟（a)的血清白蛋白濃度值， 或（ii)步驟（b)所述的一種或多種免疫分析物的濃度全部小于來自健康個(gè)體的相對應(yīng)的 中值免疫分析物濃度；和 g.鑒定所述第二個(gè)體比所述第一個(gè)體具有更高的死于肝損傷的危險(xiǎn)。
35. 權(quán)利要求34的方法，其還包括：提供在對所述第一個(gè)體進(jìn)行肝移植之前對所述第 二個(gè)體進(jìn)行肝移植的推薦。
36. 權(quán)利要求34的方法，其中在提供所述推薦的6個(gè)月內(nèi)對所述第二個(gè)體進(jìn)行肝移植。
【專利摘要】本發(fā)明提供用于表征個(gè)體中的肝損傷的方法和試劑盒。所述方法利用免疫分析物作為生物標(biāo)記來檢測肝損傷，并且預(yù)測患有肝損傷的個(gè)體將經(jīng)歷威脅生命的肝衰竭的可能性。從由個(gè)體采集的血液樣品獲得或確定血清白蛋白和其他鑒定的免疫分析物的濃度值。然后，將得到的濃度值與來自具有健康的肝臟的個(gè)體的相對應(yīng)的濃度進(jìn)行比較。通過比較濃度，可以鑒定個(gè)體發(fā)展威脅生命的肝衰竭和在給定的時(shí)間期間(例如，6個(gè)月)內(nèi)需要肝移植的可能性。
【IPC分類】G01N33/50
【公開號】CN104937414
【申請?zhí)枴緾N201380066876
【發(fā)明人】赫伯特·L·邦科夫斯基, 大衛(wèi)·富羅, H·詹姆斯·諾頓, 努雷·施托伊雷爾沃德
【申請人】夏洛特-梅克倫堡醫(yī)院(商業(yè)用名:卡羅來納保健系統(tǒng))
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2013年10月24日
【公告號】EP2923202A1, US20150301066, WO2014066676A1