玉葉金花藥材中玉葉金花苷g的含量測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥材質(zhì)量控制技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及玉葉金花巧G，尤其是一種玉葉金花藥材 中玉葉金花巧G的含量測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[000引玉葉金花為茜草科植物玉葉金花（MussaendapubescensAit.f.)的干燥莖、根， 具有清熱解暑，涼血解毒的功效，在嶺南地區(qū)廣泛使用，主要用于治療感冒、中暑、腎炎水 月中、咽喉腫痛、支氣管炎等病癥，國(guó)內(nèi)清火消炎類藥的知名品牌玉葉解毒顆粒、玉葉清火片 中玉葉金花均作為君藥使用。
[0003] 文獻(xiàn)報(bào)道玉葉金花藥材主要含有祗類、=祗皂巧類等成分。玉葉金花收載于《廣西 壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》第一卷，標(biāo)準(zhǔn)中只有理化鑒別，其他成藥中也僅見(jiàn)薄層鑒別，尚 未見(jiàn)關(guān)于其含量測(cè)定的相關(guān)報(bào)道。為了保障其臨床用藥的安全、有效、穩(wěn)定，必須建立質(zhì)量 控制方法，W保證藥材質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種精密度高、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性好、回收率高、 測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確的玉葉金花藥材中玉葉金花巧G的含量測(cè)定方法，從而實(shí)現(xiàn)有效控制玉葉金 花藥材的質(zhì)量，確保其臨床用藥的安全、有效。
[0005] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案；玉葉金花藥材中玉葉金花巧G 的含量測(cè)定方法，W玉葉金花巧G為對(duì)照，W己膳：水\〇. 01%磯酸=25~40:60~75為 流動(dòng)相進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定。
[0006] 上述玉葉金花藥材中玉葉金花巧G的含量測(cè)定方法，按照《中國(guó)藥典》2010版一部 附錄VID高效液相色譜法測(cè)定操作，包括W下步驟：
[0007] <1〉色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)
[000引 WC18鍵合硅膠為填充劑；W己膳：水\0. 01 %磯酸=25~40:60~75為流動(dòng) 相；流速為0. 5~2ml?min-i;柱溫為25~40°C;檢測(cè)波長(zhǎng)為260~270nm;理論板數(shù)應(yīng)不 低于3000 ;
[0009] <2〉對(duì)照品溶液的制備
[0010] 精密稱取玉葉金花巧G對(duì)照品適量，用甲醇制成0. 06~0. 60mg?ml4溶液；
[0011] <3〉供試品溶液的制備
[0012] 取玉葉金花藥材粉末（過(guò)40目）2.0~5.Og，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇 30~40ml，超聲30~50min，放冷，用甲醇補(bǔ)足失重，過(guò)濾，取續(xù)濾液，過(guò)0. 45ym微孔濾膜， 即得；
[001引 <4〉測(cè)定法
[0014] 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10~注入高效液相色譜儀，測(cè) 定，即得。
[0015] 上述玉葉金花藥材中玉葉金花巧G的含量測(cè)定方法，按照《中國(guó)藥典》2010版一部 附錄VID高效液相色譜法測(cè)定操作，包括W下步驟：
[0016] <1〉色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)
[0017]WC18鍵合硅膠為填充劑；W己膳：水=38:62為流動(dòng)相；流速為1ml?min-i;柱 溫為25°C;檢測(cè)波長(zhǎng)為265皿；理論板數(shù)應(yīng)不低于3000;
[001引<2〉對(duì)照品溶液的制備
[0019] 精密稱取玉葉金花巧G對(duì)照品適量，用甲醇制成0. 60mg?ml4溶液；
[0020] <3〉供試品溶液的制備
[0021] 取玉葉金花藥材粉末（過(guò)40目）3.Og，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇30ml， 超聲40min，放冷，用甲醇補(bǔ)足失重，過(guò)濾，取續(xù)濾液，過(guò)0. 45ym微孔濾膜，即得；
[0022] <4〉測(cè)定法
[0023] 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 y以注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即 得。
[0024] 針對(duì)目前玉葉金花藥材僅有定性而無(wú)定量檢測(cè)的問(wèn)題，發(fā)明人通過(guò)對(duì)玉葉金花藥 材中玉葉金花巧G的含量進(jìn)行定量研究，建立了一種玉葉金花藥材中玉葉金花巧G的含量 測(cè)定方法，W玉葉金花巧G為對(duì)照，W己膳：水\〇. 01%磯酸=25~40:60~75為流動(dòng)相進(jìn) 行高效液相色譜測(cè)定。該法完善了玉葉金花藥材的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，為玉葉金花藥材質(zhì)量標(biāo) 準(zhǔn)的建立奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明選擇玉葉金花藥材中玉葉金花巧G為指標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定，精 密度高、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性好、回收率高、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，可有效控制玉葉金花藥材的質(zhì)量， 從而實(shí)現(xiàn)確保其臨床用藥的安全、有效。
【附圖說(shuō)明】
[0025] 圖1是應(yīng)用本發(fā)明含量測(cè)定方法的玉葉金花巧G對(duì)照品的高效液相色譜圖。
[0026] 圖2是應(yīng)用本發(fā)明含量測(cè)定方法的玉葉金花對(duì)照藥材的高效液相色譜圖。
[0027] 圖3是應(yīng)用本發(fā)明含量測(cè)定方法的玉葉金花藥材的高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[002引玉葉金花藥材中玉葉金花巧G的含量測(cè)定方法試驗(yàn)研究
[0029]1.儀器與試藥
[0030] 1200系列高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent)，Techmate C18色譜柱（4.6mmX250mm， 5 ym)，BSllOS型1/10萬(wàn)電子分析天平（梅特勒公司）。DFY-500粉碎機(jī)（浙江省溫嶺市 林大機(jī)械有限公司），9200S超聲波清洗器（上海）。
[0031] 玉葉金花藥材（采自十個(gè)不同產(chǎn)地）；玉葉金花對(duì)照藥材購(gòu)自中檢所 (121404-200401);玉葉金花巧G對(duì)照品（自制），純度98. 0%，"CNMR、iHNMR、MS譜圖數(shù)據(jù) 與文獻(xiàn)一致；甲醇、己膳均為色譜純，其他試劑為分析純。
[0032] 2.色譜條件的選擇
[0033] 發(fā)明人在進(jìn)行玉葉金花巧G色譜條件的選擇時(shí)，尤其對(duì)檢測(cè)波長(zhǎng)及流動(dòng)相系統(tǒng)進(jìn) 行了選擇。確定玉葉金花巧G的色譜條件為；TechmateC18(4.6 * 250mm，5]im)色譜柱； 己膳-水（38:6。為流動(dòng)相；流速為1ml?min-i;柱溫為25°C;檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm。
[0034] (1)檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
[0035] 對(duì)玉葉金花巧G進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，結(jié)果顯示其在265nm有最大吸收，故選擇265nm 為檢測(cè)波長(zhǎng)。
[0036] 似流動(dòng)相的選擇
[0037] 考察了不同比例己膳-水，己膳-磯酸水，甲醇-水為流動(dòng)相對(duì)分離效果的影響。 結(jié)果表明，己膳-水（38:62)較合適，可使樣品中目標(biāo)峰與雜質(zhì)峰達(dá)到分離，峰型較好，故選 為流動(dòng)相。
[003引 3.供試品提取條件的選擇
[0039] (1)提取溶劑的選擇
[0040] 考察了甲醇、60%己醇及95%己醇作為提取溶劑，結(jié)果表明甲醇的提取效率較高。
[0041] (2)提取方法的選擇
[0042] 對(duì)超聲提取40min，熱回流提取比，索氏提取化，=種提取方法提取率進(jìn)行比較， 提取率基本一致，考慮超聲提取方法操作簡(jiǎn)便、省時(shí)，故選擇超聲提取。
[0043] (3)提取時(shí)間的選擇
[0044] 超聲提取30min，40min，60min，對(duì)立者的提取率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)30min提取率稍 低，40min與60min提取率基本一致，故最終選擇供試品提取方法為加入甲醇，超聲提取 40min。4.線性關(guān)系考察
[0045] 分別精密吸取玉葉金花巧G對(duì)照品溶液0,1. 0ml，2. 5ml，5. 0ml，7. 5ml于10ml量 瓶中，加甲醇溶液至刻度。分別進(jìn)樣20yl，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。分別重復(fù)進(jìn)樣3 次；W對(duì)應(yīng)的對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，其峰面積平均值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程 Y= 878. 44X+127. 79(r= 0. 9999)，線性范圍 0. 06 ~0. 60mg/ml。
[0046] 5.精密度試驗(yàn)
[0047] 精密吸取上述玉葉金花巧G照品溶液各20y1，連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積的RSD為 1. 82%。
[0048] 6.重復(fù)性試驗(yàn)
[0049] 精密稱取同玉葉金花樣品共6份，按本發(fā)明所述含量測(cè)定方法中的供試品的制備 方法制備，測(cè)定得玉葉金花巧G含量的RSD分別為2. 84%。
[0050]7.穩(wěn)定性試驗(yàn)
[0化1] 精密吸取同一供試品溶液分別于0, 2,4,6,8,1化進(jìn)樣，測(cè)定玉葉金花巧G含量的 RSD分別為0. 15%。表明供試液在12h內(nèi)穩(wěn)定。
[0化2] 8.加樣回收率試驗(yàn)
[0化3] 采用加樣回收法，取已知含量的樣品，精密稱定，分別精密加入一定量的玉葉金花 巧G，按照本發(fā)明技術(shù)方案中所述的供試品的制備方法來(lái)制備供試液，按照上述測(cè)定方法進(jìn) 行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0054]表1加樣回收率測(cè)定結(jié)果[0 化 5]
[0化6] 9.樣品測(cè)定
[0化7] 按本發(fā)明所述的方法制備供試品和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算玉葉 金花巧G的含量，結(jié)果見(jiàn)表2和圖1至3。
[0化引表2 10批藥材及玉葉金花對(duì)照藥材中玉葉金花巧G的含量測(cè)定結(jié)果
[0059]
[0061] 實(shí)施例1玉葉金花藥材（中檢所對(duì)照藥材121404-200401)中玉葉金花巧G的含 量測(cè)定
[0062] 按照《中