min ;
(2)將混合溶液轉(zhuǎn)移至高壓反應(yīng)釜中，300°C溫度下反應(yīng)14 h ;
(3)所得產(chǎn)物用超純水和乙醇各離心洗滌3次，80°C下真空干燥15 h，制得多孔二氧化鈦納米顆粒；
(4)將制得的30mg 二氧化鈦加入至50 mL、20 mmol硝酸鎘溶液中，超聲2 min, 50 °C水浴振蕩4 h，離心水洗；
將20 mg鎘離子功能化的二氧化鈦納米顆粒分散在7.5 mL、4 mg/mL聚丙稀胺鹽酸鹽溶液中，攪拌1 h ;
(6)加入400PL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的戊二醛，震蕩2 h ;
(7)將所得溶液離心洗滌，用pH7.0的PBS分散，加入100 μ?、200 μ g/mL地塞米松抗體震蕩20 h，離心洗去多余抗體，分散在2 mL含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2% BSA的pH 7.0的PBS溶液里，于4 °C冰箱中儲存以備用。
[0022]實施例7地塞米松的檢測
(1)在所制備的光電化學(xué)傳感器電極表面，滴加6 μ?、0.1 mol/L的硫化鈉溶液，放置30 min ；
(2 )使用電化學(xué)工作站以三電極體系進(jìn)行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，制備的ΙΤ0修飾電極為工作電極，在10 mL、pH 6.0的PBS，0.05 mol/L的抗壞血酸緩沖溶液中進(jìn)行測試；
(3)用時間-電流法對地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測，設(shè)置電壓為-0.1 V，運(yùn)行時間100s，光源波長為405 nm ；
(4)背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔20s開燈持續(xù)照射10 s，記錄光電流，繪制工作曲線； (5 )將待測的地塞米松樣品溶液代替地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測。
[0023]實施例8地塞米松的檢測
(1)在所制備的光電化學(xué)傳感器電極表面，滴加6 μ?、0.4 mol/L的硫化鈉溶液，放置30?50 min ；
(2 )使用電化學(xué)工作站以三電極體系進(jìn)行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，制備的ITO修飾電極為工作電極，在10 mL、pH 7.0的PBS，0.1 mol/L的抗壞血酸緩沖溶液中進(jìn)行測試；
(3)用時間-電流法對地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測，設(shè)置電壓為0V，運(yùn)行時間100 s，光源波長為430 nm ；
(4)背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔20s開燈持續(xù)照射10 s，記錄光電流，繪制工作曲線； (5 )將待測的地塞米松樣品溶液代替地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測。
[0024]實施例9地塞米松的檢測
(1)在所制備的光電化學(xué)傳感器電極表面，滴加6 μ?、0.7 mol/L的硫化鈉溶液，放置50 min ；
(2 )使用電化學(xué)工作站以三電極體系進(jìn)行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，制備的ΙΤ0修飾電極為工作電極，在10 mL、pH 8.(^^PBS，0.2 mol/L的抗壞血酸緩沖溶液中進(jìn)行測試；
(3)用時間-電流法對地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測，設(shè)置電壓為0.1 V，運(yùn)行時間100s，光源波長為450 nm ；
(4)背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔20s開燈持續(xù)照射10 s，記錄光電流，繪制工作曲線； (5 )將待測的地塞米松樣品溶液代替地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測。
【主權(quán)項】
1.一種基于原位生成硫化鎘檢測地塞米松光電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)羧基化氮化碳納米片的制備 在陶瓷坩禍中加入5 g的三聚氰胺于馬弗爐中500~600 °C煅燒3~5 h，冷卻至室溫，取0.5-2.0 g的氮化碳加入50-200 mL、2.5-10 mol/L的硝酸水溶液中于120-130 °C回流.20-28 h，冷卻至室溫后，回流產(chǎn)物用超純水離心洗滌，30~40 °(:真空干燥10~14 h ； (2)硫化祕納米棒的制備 .1.0-3.0 g的硝酸鉍溶解于10~50 mL乙二醇中，通氮氣15 min，得溶液A，0.7-2.8 g的硫化鈉溶解于5~20 mL乙二醇和10~40 mL超純水混合液中，均勻攪拌15 min后，得溶液B，所得溶液B在磁力攪拌下逐滴加入溶液A中，得溶液C，再將1.0-3.0 g尿素和5~20 mL超純水加入混合液C中攪拌15~60 min，混合液轉(zhuǎn)入反應(yīng)釜中160~200 °C下反應(yīng)20~28 h，降至室溫后，抽真空過濾收集，然后依次用無水乙醇和超純水各離心洗滌3次，真空60 V干燥； (3)光電化學(xué)傳感器的制備 .1)將導(dǎo)電玻璃依次用洗潔精、丙酮、乙醇和超純水超聲清洗，氮氣吹干； .2)分別取6μ?、2~8 mg/mL羧基化氮化碳溶液和6 μ?、2~8 mg/mL硫化鉍溶液依次滴加到IT0導(dǎo)電玻璃的導(dǎo)電面，室溫下晾干，馬弗爐中300~500 °C煅燒15~60 min，冷卻至室溫; . 3)在修飾電極表面滴加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01%~0.1%的殼聚糖溶液，依次用0.01 mol/L氫氧化鈉溶液和超純水沖洗電極表面，室溫下自然晾干成膜； .4)滴加20PL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%~10%的戊二醛，超純水清洗，室溫下自然晾干； .5)滴加6μ?、5~20 Pg/mL的地塞米松半抗原于修飾電極表面，超純水沖洗電極表面，4°C冰箱中晾干； .6)滴加3PL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%~3%的牛血清白蛋白溶液，以此封閉電極表面上非特異性活性位點，超純水沖洗電極表面，4 °C冰箱中晾干； .7)滴加6μ?、5 pg/mL~50 ng/mL地塞米松抗原和鎘離子功能化二氧化鈦抗體孵化物的混合溶液，超純水沖洗電極表面，4 °(:冰箱中自然晾干，制得一種檢測地塞米松的光電化學(xué)傳感器。2.如權(quán)利要求1所述的一種基于原位生成硫化鎘檢測地塞米松光電化學(xué)傳感器的制備方法，所述鎘離子功能化二氧化鈦抗體孵化物，其特征在于，制備步驟如下: (1)0.01-0.04 mol鈦酸四丁酯溶解于15~60 mL乙醇中，加入5~20 mL水，磁力攪拌.100-140 min ； (2)將混合溶液轉(zhuǎn)移至高壓反應(yīng)釜中，100~300°C溫度下反應(yīng)10~14 h ; (3)所得產(chǎn)物用超純水和乙醇各離心洗滌3次，80°C下真空干燥11~15 h，制得多孔二氧化鈦納米顆粒； (4)將制得的10~30mg 二氧化鈦加入至50 mL、5~20 mmol硝酸鎘溶液中，超聲2 min,.50 °(:水浴振蕩1~4 h，離心水洗； (5)將7~20mg鎘離子功能化的二氧化鈦納米顆粒分散在7.5 mL、1-4 mg/mL聚丙稀胺鹽酸鹽溶液中，攪拌1 h ； (6)加入100~400μ?、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%~ 5%的戊二醛，震蕩2 h ； (7)將所得溶液離心洗滌，用pH7.0的PBS分散，加入100 μ?,50-200 μ g/mL地塞米松抗體震蕩20 h，離心洗去多余抗體，分散在2 mL含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5% -2% BSA的pH 7.0的PBS溶液里，于4 °C冰箱中儲存以備用。3.如權(quán)利要求1所述的一種基于原位生成硫化鎘檢測地塞米松光電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，制備步驟如下: (1)在所制備的光電化學(xué)傳感器電極表面，滴加6 μ?、0.1-0.7 mol/L的硫化鈉溶液，放置 30-50 min ； (2 )使用電化學(xué)工作站以三電極體系進(jìn)行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，制備的IT0修飾電極為工作電極，在10 mL、pH 6.0-8.0的PBS，0.05-0.2 mol/L的抗壞血酸緩沖溶液中進(jìn)行測試； (3)用時間-電流法對地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測，設(shè)置電壓為-0.1-0.1 V，運(yùn)行時間.100 S，光源波長為405~450 nm ； (4)背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔20s開燈持續(xù)照射10 s，記錄光電流，繪制工作曲線； (5 )將待測的地塞米松樣品溶液代替地塞米松標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種原位生成硫化鎘檢測地塞米松的光電化學(xué)傳感器的制備方法。本發(fā)明具體是采用羧基化氮化碳和硫化鉍作為基底材料，鎘離子功能化的二氧化鈦標(biāo)記地塞米松抗體。通過在電極表面直接滴加硫化鈉，原位生成高光電轉(zhuǎn)換效率的窄帶隙硫化鎘半導(dǎo)體納米材料，在可見光波長的光源照射下產(chǎn)生光電流信號。載體多孔二氧化鈦與硫化鎘能帶匹配良好，從而提高硫化鎘的光電轉(zhuǎn)換效率，實現(xiàn)了對地塞米松的高靈敏檢測，其檢測限為2pg/mL。
【IPC分類】G01N27/327
【公開號】CN105259236
【申請?zhí)枴緾N201510809271
【發(fā)明人】魏琴, 王雪萍, 閆濤, 李燕, 馬洪敏, 杜斌
【申請人】濟(jì)南大學(xué)
【公開日】2016年1月20日
【申請日】2015年11月22日
【公告號】CN105259236B