一種正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥制劑檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖 譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 正天丸收載于中國(guó)藥典2015年版一部，是由原第一軍醫(yī)大學(xué)南方醫(yī)院中醫(yī)科陳寶 田名老中醫(yī)的臨床經(jīng)驗(yàn)方開(kāi)發(fā)而成，由原料藥鉤藤、白芍、川芎、當(dāng)歸、地黃、白芷、防風(fēng)、羌 活、桃仁、紅花、細(xì)辛、獨(dú)活、麻黃、黑順片、雞血藤等15味藥組成，具有疏風(fēng)活血、養(yǎng)血平肝、 通絡(luò)止痛的功效。
[0003] 關(guān)于正天丸制劑的檢測(cè)，現(xiàn)有紅花、雞血藤、桃仁、防風(fēng)的顯微鑒別，鉤藤、白芍、麻 黃、獨(dú)活的薄層鑒別與白芍的含量測(cè)定，但制劑中揮發(fā)性傘形科植物當(dāng)歸、川芎、羌活、獨(dú) 活、防風(fēng)、白芷以及細(xì)辛等7味藥材中只對(duì)獨(dú)活、防風(fēng)2味藥進(jìn)行鑒別，尚無(wú)對(duì)所含7種揮發(fā)性 傘形科植物成分的整體檢測(cè)方法。而目前研究表明，傘形科植物芳香揮發(fā)性成分具有較好 的通絡(luò)、避穢、改善血液流變學(xué)異常等療效，細(xì)辛揮發(fā)油具有祛風(fēng)散寒、通竅止痛等功效，均 是正天丸制劑發(fā)揮藥理作用的主要組成部分。
[0004] 因此，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中尚無(wú)較全面的質(zhì)量控制方法反映正天丸制劑中揮發(fā)性藥物 成分的質(zhì)量狀況，構(gòu)建一種對(duì)正天丸中的多種揮發(fā)性藥成分進(jìn)行檢測(cè)的方法，以整體、有效 控制正天丸制劑質(zhì)量，是具有重要意義的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中沒(méi)有正天丸制劑中揮發(fā)性成 分的特征圖譜以及對(duì)正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法，從而提供一種正天丸制劑中揮 發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法。
[0006] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 本發(fā)明提供一種正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法，所述構(gòu)建方法 包括如下步驟：
[0008] (1)供試品溶液制備:取正天丸制劑粉末15重量份，精密稱(chēng)定，置燒瓶中，加入蒸餾 水240體積份及玻璃珠，利用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，冷卻后收集乙酸乙酯層并加乙酸乙 酯定容至2體積份，加無(wú)水硫酸鈉，靜置，取上層液，濾過(guò)；
[0009] (2)對(duì)照品溶液制備：取藁本內(nèi)酯對(duì)照品精密稱(chēng)定，加甲醇制成為每1體積份含 0.0002重量份藁本內(nèi)酯的對(duì)照品溶液；
[0010] (3)色譜條件:進(jìn)樣口溫度:270°C，檢測(cè)器溫度:300°C，分流比1:50，載氣:氮?dú)?，?氣壓力：55KPa，空氣壓力：45KPa，尾吹掃：30mL · min-1，柱流量：lmL · min-1;
[0011] 程序升溫:起始溫度:70°C，保持lmin;以2°C · min-1的速率升至90°C，保持lmin; 以5°C · min-1的速率升至220°C，保持lmin;以12°C · min-1的速率升至270°C，保持5min;
[0012] (4)分別精密吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液luL，注入氣相色譜儀，測(cè)定；
[0013] (5)建立正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜:根據(jù)至少16批次(批號(hào)：1503023H、 1503024H、1503025H、1503026H、1503027H、1503028H、1503029H、1503030H、1503031H、 1503032H、1503033H 1503034H，1407025H，1408001H，1408003H，1408027H)正天丸制劑的色 譜圖中各色譜峰的保留時(shí)間，確定共有峰，并選取其中20個(gè)共有峰作為特征峰建立對(duì)照特 征圖譜;其中以19號(hào)峰為參照峰S，計(jì)算各色譜峰保留時(shí)間與同一圖譜中S峰的保留時(shí)間比 值，得到的相對(duì)保留時(shí)間比值為：
[0014] 1 號(hào)峰：0.1016±0.0051;2號(hào)峰：0.1105±0.0055;
[0015] 3 號(hào)峰：0·2192±0· 0110 ;4 號(hào)峰：0.2587 ±0.0129;
[0016] 5 號(hào)峰：0.4965±0.0248;6號(hào)峰：0.5983±0.0299;
[0017] 7 號(hào)峰：0.6228±0.0311;8號(hào)峰：0.6488±0.0324;
[0018] 9 號(hào)峰：0 · 7318 ± 0 · 0366; 10 號(hào)峰：0 · 7385 ± 0 · 0369;
[0019] 11 號(hào)峰：0.8072±0.0404;12號(hào)峰：0.8135±0.0407;
[0020] 13 號(hào)峰：0 · 8822 ± 0 · 0441; 14 號(hào)峰：0 · 9380 ± 0 · 0469;
[0021 ] 15 號(hào)峰：0 · 9532 ± 0 · 0477; 16 號(hào)峰：0 · 9674 ± 0 · 0484;
[0022] 17 號(hào)峰：0 · 9884 ± 0 · 0494; 18號(hào)峰：0 · 9925 ± 0 · 0496;
[0023] 19 號(hào)峰：1; 20 號(hào)峰：1 · 1811 ±0 · 0591;
[0024] (6)共有峰的指認(rèn):使用GC-MS技術(shù)對(duì)正天丸制劑中揮發(fā)性成分的對(duì)照特征圖譜共 有峰進(jìn)行指認(rèn)，結(jié)合對(duì)照品比對(duì)，8號(hào)峰為甲基丁香酚，9號(hào)峰為阿魏酸，19號(hào)峰為藁本內(nèi)酯； [0025] (7)確定制劑與藥材的相關(guān)性:將正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜與細(xì)辛、當(dāng) 歸、川芎、獨(dú)活、羌活、防風(fēng)、白芷7味單味藥的GC特征圖譜進(jìn)行比較，對(duì)比各色譜峰的相對(duì)保 留時(shí)間，確定共有峰主要來(lái)源。
[0026]所述重量份與體積份的關(guān)系為g/mL的關(guān)系。
[0027]優(yōu)選的，所述供試品溶液制備的步驟為:取正天丸制劑粉末(過(guò)三號(hào)篩）15重量份， 精密稱(chēng)定，置燒瓶中，加入蒸餾水240體積份及玻璃珠，連接揮發(fā)油提取器，自揮發(fā)油提取器 上端加水至叉口有水溢入燒瓶為止，并由揮發(fā)油提取器上端定量加入2體積份乙酸乙酯，保 持微沸狀態(tài)2h;冷卻后，收集乙酸乙酯層并加乙酸乙酯定容至2體積份，加無(wú)水硫酸鈉，靜 置，取上層液，濾過(guò)。
[0028] 優(yōu)選的，所述正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法中采用弱極性毛細(xì) 管柱。
[0029] 本發(fā)明還提供一種正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述方法 包括以下步驟：
[0030] (1)供試品溶液制備:取正天丸制劑粉末15重量份，精密稱(chēng)定，置燒瓶中，加入蒸餾 水240體積份及玻璃珠，利用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，冷卻后收集乙酸乙酯層并加乙酸乙 酯定容至2體積份，加無(wú)水硫酸鈉，靜置，取上層液，濾過(guò)；
[0031] (2)對(duì)照品溶液制備：取藁本內(nèi)酯對(duì)照品精密稱(chēng)定，加甲醇制成為每1體積份含 0.0002重量份藁本內(nèi)酯的對(duì)照品溶液；
[0032] (3)色譜條件:進(jìn)樣口溫度:270°C，檢測(cè)器溫度:300°C，分流比1:50，載氣:氮?dú)?，?氣壓力：55KPa，空氣壓力：45KPa，尾吹掃：30mL · min-1，柱流量：lmL · min-1;
[0033] 程序升溫:起始溫度:70°C，保持lmin;以2°C · min-1的速率升至90°C，保持lmin; 以5°C · min-1的速率升至220°C，保持lmin;以12°C · min-1的速率升至270°C，保持5min;
[0034] (4)分別精密吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液luL，注入氣相色譜儀，測(cè)定；
[0035] (5)將供試品溶液圖譜與正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜比較，相對(duì)保留時(shí) 間在±5%以?xún)?nèi)的為合格。
[0036]所述重量份與體積份的關(guān)系為g/mL的關(guān)系。
[0037]優(yōu)選的，所述供試品溶液制備的步驟為:取正天丸制劑粉末(過(guò)三號(hào)篩）15重量份， 精密稱(chēng)定，置燒瓶中，加入蒸餾水240體積份及玻璃珠，連接揮發(fā)油提取器，自揮發(fā)油提取器 上端加水至叉口有水溢入燒瓶為止，并由揮發(fā)油提取器上端定量加入2體積份乙酸乙酯，保 持微沸狀態(tài)2h;冷卻后，收集乙酸乙酯層并加乙酸乙酯定容至2體積份，加無(wú)水硫酸鈉，靜 置，取上層液，濾過(guò)。
[0038]優(yōu)選的，所述正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法中采用弱極性毛細(xì)管柱。
[0039]本發(fā)明還提供一種上述方法用于正天丸制劑檢測(cè)領(lǐng)域中的用途。
[0040]本發(fā)明技術(shù)方案，具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0041] 1.本發(fā)明提供的正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑 中揮發(fā)性成分的檢測(cè)方法，通過(guò)揮發(fā)油測(cè)定器提取揮發(fā)性成分制備供試品溶液，獲得的圖 譜整體性好，峰數(shù)