目多且分離度好，有利于進(jìn)行正天丸制劑的質(zhì)量控制。
[0042] 2.本發(fā)明提供的正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑 中揮發(fā)性成分的檢測方法，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證其精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性好，為正天丸制劑整體 質(zhì)量控制提供了方法參考。
[0043] 3.本發(fā)明提供的正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法及正天丸制劑 中揮發(fā)性成分的檢測方法，選用弱極性毛細(xì)管柱分析，峰數(shù)明顯多于極性柱且分離度好。
【附圖說明】
[0044]為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解，下面根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例并結(jié)合 附圖，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，其中：
[0045]圖1供試品溶液提取方法比較；
[0046]圖2使用不同色譜柱獲得的圖譜，圖2-1為使用RTX-WAX色譜柱獲得的圖譜，圖2-2 為使用RTX-5色譜柱獲得的圖譜；
[0047]圖3是本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例2建立的正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜；
[0048]圖4是本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例3中16批正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測圖譜；
[0049]圖5是正天丸制劑中單味藥的GC特征圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0050] 實(shí)施例1
[0051] 本實(shí)施例所述正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜的構(gòu)建方法，包括如下步驟：
[0052] (1)供試品溶液制備:取正天丸制劑粉末(過三號篩）15g，精密稱定，置燒瓶中，加 入蒸餾水240mL及玻璃珠，連接揮發(fā)油提取器，自揮發(fā)油提取器上端加水至叉口有水溢入燒 瓶為止，并由揮發(fā)油提取器上端定量加入2mL乙酸乙酯，保持微沸狀態(tài)2h;冷卻后，收集乙酸 乙酯層并加乙酸乙酯定容至2mL，加無水硫酸鈉，靜置，取上層液，濾過；
[0053] (2)對照品溶液制備:取藁本內(nèi)酯對照品精密稱定，加甲醇制成為每lmL含200yg藁 本內(nèi)酯的對照品溶液；
[0054] (3)色譜條件：
[0055] 采用RTX-5毛細(xì)管柱（30m X 0 · 25mm X 0 · 25μπι，Restek);
[0056] 進(jìn)樣口溫度：270°C，檢測器溫度：300°C，分流比1: 50，載氣：氮?dú)猓瑲錃鈮毫Γ?55KPa，空氣壓力：45KPa，尾吹掃：30mL · min-1，柱流量：lmL · min-1;
[0057] 程序升溫:起始溫度:70°C，保持lmin;以2°C · min-1的速率升至90°C，保持lmin; 以5°C · min-1的速率升至220°C，保持lmin;以12°C · min-1的速率升至270°C，保持5min;
[0058] (4)分別精密吸取供試品溶液及對照品溶液luL，注入氣相色譜儀，測定；
[0059] (5)建立正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜：取16批正天丸制劑樣品（批號： 1503023H、1503024H、1503025H、1503026H、1503027H、1503028H、1503029H、1503030H、 1503031H、1503032H、1503033H1503034H，1407025H，1408001H，1408003H，1408027H)，按 "(1)"項(xiàng)下方法制備供試品溶液，精密吸取luL，分別注入氣相色譜儀，在"(3)"項(xiàng)下色譜條 件下進(jìn)樣分析，根據(jù)所得色譜圖中各色譜峰的相對保留時(shí)間，確定共有峰，并選取其中20個(gè) 共有峰作為特征峰建立對照特征圖譜;其中以19號峰為參照峰S，計(jì)算各色譜峰保留時(shí)間與 同一圖譜中S峰的保留時(shí)間比值，得到的相對保留時(shí)間比值為：
[0060] 1 號峰：0.1016±0.0051;2號峰：0.1105±0.0055;
[0061] 3 號峰：0·2192±0· 0110 ;4 號峰：0.2587 ±0.0129;
[0062] 5 號峰：0 · 4965 ± 0 · 0248; 6 號峰：0 · 5983 ± 0 · 0299;
[0063] 7 號峰：0.6228±0.0311;8號峰：0.6488±0.0324;
[0064] 9 號峰：0.7318±0.0366;10號峰：0.7385±0.0369;
[0065] 11 號峰：0.8072±0.0404;12號峰：0.8135±0.0407;
[0066] 13 號峰：0 · 8822 ± 0 · 0441; 14 號峰：0 · 9380 ± 0 · 0469;
[0067] 15 號峰：0 · 9532 ± 0 · 0477; 16 號峰：0 · 9674 ± 0 · 0484;
[0068] 17 號峰：0 · 9884 ± 0 · 0494; 18 號峰：0 · 9925 ± 0 · 0496;
[0069] 19 號峰：1; 20 號峰：1 · 1811 ±0 · 0591;
[0070] (6)共有峰的指認(rèn):使用GC-MS技術(shù)對正天丸制劑中揮發(fā)性成分的對照特征圖譜共 有峰進(jìn)行指認(rèn)，結(jié)合對照品比對，8號峰為甲基丁香酚，9號峰為阿魏酸，19號峰為藁本內(nèi)酯； [0071] (7)確定制劑與藥材的相關(guān)性:將正天丸制劑中揮發(fā)性成分的特征圖譜與細(xì)辛、當(dāng) 歸、川芎、獨(dú)活、羌活、防風(fēng)、白芷7味單味藥的GC特征圖譜進(jìn)行比較(參見圖5)，對比各色譜 峰的相對保留時(shí)間，確定共有峰主要來源。
[0072]其中單味藥的藥材樣品稱樣量分別為：細(xì)辛、當(dāng)歸、川芎、防風(fēng)、白芷、羌活均為 33.6g，獨(dú)活20.4g，制備方法與步驟（1)供試品溶液制備所述方法相同；色譜條件中的分流 比：細(xì)辛、當(dāng)歸、獨(dú)活、羌活、防風(fēng)、白芷為200:1，川芎110:1，其他條件與步驟(3)所述的色譜 條件一致。
[0073] 實(shí)施例2
[0074]本實(shí)施例所述正天丸制劑中揮發(fā)性成分的檢測方法，包括以下步驟：
[0075] (1)供試品溶液制備：將16批正天丸制劑（批號：1503023H、1503024H、1503025H、 1503026H、1503027H、1503028H、1503029H、1503030H、1503031H、1503032H、1503033H 1503034H，1407025H，1408001H，1408003H，1408027H，華潤三九醫(yī)藥股份有限公司提供），每 批分別取取正天丸制劑粉末15g(過三號篩），精密稱定，置燒瓶中，加入蒸餾水240mL及玻璃 珠，連接揮發(fā)油提取器，自揮發(fā)油提取器上端加水至叉口有水溢入燒瓶為止，并由揮發(fā)油提 取器上端定量加入2mL乙酸乙酯，保持微沸狀態(tài)2h;冷卻后，收集乙酸乙酯層并加乙酸乙酯 定容至2mL，加無水硫酸鈉，靜置，取上層液，濾過；
[0076] (2)對照品溶液制備:取藁本內(nèi)酯對照品精密稱定，加甲醇制成為每lmL含200yg藁 本內(nèi)酯的對照品溶液；
[0077] ⑶色譜條件：
[0078] 采用RTX-5毛細(xì)管柱（30m X 0 · 25mm X 0 · 25μπι，Restek);
[0079] 進(jìn)樣口溫度：270°C，檢測器溫度：300°C，分流比1: 50，載氣：氮?dú)猓瑲錃鈮毫Γ?55KPa，空氣壓力：45KPa，尾吹掃：30mL · min-1，柱流量：lmL · min-1;
[0080] 程序升溫:起始溫度:70°C，保持lmin;以2°C · min-1的速率升至90°C，保持lmin; 以5°C · min-1的速率升至220°C，保持lmin;以12°C · min-1的速率升至270°C，保持5min;
[0081] (4)分別精密吸取供試品溶液及對照品溶液luL，注入氣相色譜儀，測定；
[0082] (5)將供試品溶液圖譜與實(shí)施例1所得特征圖譜的相對保留時(shí)間進(jìn)行比較。
[0083]實(shí)驗(yàn)例1條件優(yōu)化
[0084] 1.儀器與試藥
[0085] 1.1 儀器
[0086]島津GC-2014氣相色譜儀（日本島津公司）；
[0087] DFID檢測器（日本島津公司）；
[0088] RTX-5毛細(xì)管柱（30mX 0 · 25mmX 0 · 25μπι，Restek)，
[0089] 1.2 試藥
[0090] 乙酸乙酯（分析純），上海阿拉丁生化科技股份有限公司產(chǎn)；藁本內(nèi)酯對照品（批 號：111737-201305; ID號:LTVC-SY2T)，購于中國食品藥品檢定研究院；
[0091] 甲基丁香酚對照品（批號：111642-200301)，購于中國食品藥品檢定研究院