:分別準(zhǔn)確量取體積比為95:5的乙腈和純化水混合均勻，按照體積 比為0.5%加入磷酸，混合均勾，用0.45μηι的過濾膜抽濾，濾液超聲排氣10min;
[0147] (2)將藥物球囊導(dǎo)管的球囊部分用步驟(1)得到的流動(dòng)相浸沒，用球囊擴(kuò)充壓力栗 充壓以展開球囊，加蓋超聲浸提l〇min后，將所有溶液轉(zhuǎn)移到10mL容量瓶內(nèi)，用步驟(1)得到 的流動(dòng)相定容到刻度線，搖勻，密封。
[0148] (3)用1. Ομπι的針筒式過濾器過濾溶液，HPLC進(jìn)樣測(cè)試，色譜條件為：
[0149] 柱溫：50〇C，
[0150] 流速:0· lmL/min，
[0151] 進(jìn)樣量:5yL，
[0152] 示差折光檢測(cè)器:RI，檢測(cè)池溫度40°C
[0153] 環(huán)境條件:溫度：20 ± 5°C，濕度：小于70 % RH;
[0154] (4)按上述條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，定性說明聚乙二醇純物質(zhì)在該色譜體系的 出峰位置、峰形以及該藥物涂層中各物質(zhì)的分離狀況。
[0155] 實(shí)施例9
[0156] 待檢測(cè)樣品為帶有藥物涂層的球囊導(dǎo)管，該藥物涂層中含有具有治療作用的藥物 紫杉醇和輔料，輔料中包含一定量的聚乙二醇以及硬脂酸鎂，聚乙二醇的分子量為4000。
[0157] 色譜設(shè)備：依利特EC2000液相色譜儀和SHODEX RI-201H示差折光檢測(cè)器，依利特 P230高壓恒流栗，ZW色譜柱溫箱，EC2000色譜數(shù)據(jù)工作站；
[0158] 色譜柱:商品名為Zenix SEC的反相硅膠鍵合色譜柱(美國賽分科技有限公司），規(guī) 格為3μι3?〇 A 7 · 8mm X 300mm;
[0159] 流動(dòng)相：乙腈:色譜純;純水:純度至少達(dá)到ISO 3696所規(guī)定的一級(jí)；甲酸，色譜純， 純度 >99.9%。
[0160] (1)流動(dòng)相制備：分別準(zhǔn)確量取體積比為50: 50的乙腈和純化水混合均勻，按照體 積比為0.02 %加入甲酸，混合均勾，用0.45μηι的過濾膜抽濾，濾液超聲排氣1 Omin;
[0161] (2)將藥物球囊導(dǎo)管的球囊部分用步驟(1)得到的流動(dòng)相浸沒，用球囊擴(kuò)充壓力栗 充壓以展開球囊，加蓋超聲浸提l〇min后，將所有溶液轉(zhuǎn)移到10mL容量瓶內(nèi)，用步驟(1)得到 的流動(dòng)相定容到刻度線，搖勻，密封。
[0162] (3)用0.2μπι的針筒式過濾器過濾溶液，HPLC進(jìn)樣測(cè)試，色譜條件為：
[0163] 柱溫：l〇°C，
[0164] 流速：1 · 5mL/min，
[0165] 進(jìn)樣量:80yL，
[0166] 示差折光檢測(cè)器:RI，檢測(cè)池溫度40°C
[0167] 環(huán)境條件:溫度：20 ±5°C，濕度：小于70 % RH;
[0168] (4)按上述條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，定性說明聚乙二醇純物質(zhì)在該色譜體系的 出峰位置、峰形以及該藥物涂層中各物質(zhì)的分離狀況。
[0169] 實(shí)施例10
[0170]待檢測(cè)樣品為帶有藥物涂層的球囊導(dǎo)管，該藥物涂層中含有具有治療作用的藥物 紫杉醇和輔料，輔料中包含一定量的聚乙二醇，分子量為6000。
[0171]色譜設(shè)備：依利特EC2000液相色譜儀和SHODEX RI-201H示差折光檢測(cè)器，依利特 P230高壓恒流栗，ZW色譜柱溫箱，EC2000色譜數(shù)據(jù)工作站；
[0172]色譜柱:商品名為SRT SEC的反相硅膠鍵合色譜柱(美國賽分科技有限公司），規(guī)格 為5μηι.50〇 A 7 · 8mm X 300mm;
[0173]流動(dòng)相：乙腈:色譜純；純水:純度至少達(dá)到ISO 3696所規(guī)定的一級(jí)；甲基磺酸，色 譜純，純度>99.9%。
[0174] (1)流動(dòng)相制備:分別準(zhǔn)確量取體積比為5:95的乙腈和純化水混合均勻，按照體積 比為0.05%加入甲基磺酸，混合均勾，用0.45μηι的過濾膜抽濾，濾液超聲排氣lOmin;
[0175] (2)將藥物球囊導(dǎo)管的球囊部分用步驟(1)得到的流動(dòng)相浸沒，用球囊擴(kuò)充壓力栗 充壓以展開球囊，加蓋超聲浸提l〇min后，將所有溶液轉(zhuǎn)移到10mL容量瓶內(nèi)，用步驟(1)得到 的流動(dòng)相定容到刻度線，搖勻，密封。
[0176] (3)用1. Ομπι的針筒式過濾器過濾溶液，HPLC進(jìn)樣測(cè)試，色譜條件為：
[0177] 柱溫:80°C，
[0178] 流速:0.4mL/min，
[0179] 進(jìn)樣量:10yL，
[0180] 示差折光檢測(cè)器:RI，檢測(cè)池溫度40°C
[0181] 環(huán)境條件:溫度：20 ± 5°C，濕度：小于70 % RH;
[0182] (4)按上述條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，定性說明聚乙二醇純物質(zhì)在該色譜體系的 出峰位置、峰形以及該藥物涂層中各物質(zhì)的分離狀況。
[0183] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精 神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種聚乙二醇含量的檢測(cè)方法，其特征在于，主要包括W下步驟： 采用反相鍵合體積排阻色譜柱，將與樣品中的待測(cè)聚乙二醇分子量相等、分散度相同 或相似的聚乙二醇標(biāo)準(zhǔn)品，用流動(dòng)相溶解并稀釋，配制成一定濃度梯度的系列標(biāo)準(zhǔn)液； 將所述系列標(biāo)準(zhǔn)液過濾后分別進(jìn)樣，記錄檢測(cè)器的峰信號(hào)，按外標(biāo)法，W不同濃度的聚 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積與對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度做線性回歸，得出校準(zhǔn)曲線，聚乙二醇 的標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線方程為： Y = aX+b, 其中，a為校準(zhǔn)曲線的斜率，b為校準(zhǔn)曲線的截距，Y為聚乙二醇在檢測(cè)器輸出的信號(hào)峰 面積，X為聚乙二醇濃度，單位為yg/mL 將待測(cè)樣品用流動(dòng)相溶解，過濾后進(jìn)樣，利用所述標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線方程W及樣品中聚乙 二醇在檢測(cè)器輸出的信號(hào)峰面積，計(jì)算樣品中聚乙二醇的含量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述反相鍵合體積排阻色譜柱的載體 為硅膠基質(zhì)，固定相為硅膠填料。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述外標(biāo)法的外標(biāo)物為聚乙二醇，所 述用于外標(biāo)法的外標(biāo)物聚乙二醇的分子量及分散度與樣品中待檢測(cè)的聚乙二醇相同或相 似。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述硅膠填料的粒徑范圍為1~20WI1， 孔徑為80藻、化(始、巧OA、3Q0復(fù)或訊〇瓜5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述硅膠填料的粒徑為3WI1或扣m。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述流動(dòng)相為含離子對(duì)溶劑的乙臘水 溶液，所述離子對(duì)溶劑為憐酸、Ξ氣乙酸、甲酸、乙酸、高氯酸或甲基橫酸。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述乙臘水溶液中乙臘的體積分?jǐn)?shù)為 5~95%，所述離子對(duì)溶劑在流動(dòng)相中的體積分?jǐn)?shù)為0.02~1 %。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述反相鍵合體積排阻色譜柱的色譜 條件為:流動(dòng)相流速范圍為0.1~2mL/min;柱溫小于或等于80°C;進(jìn)樣量范圍為5~10化L。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述流動(dòng)相流速范圍為0.5~ImL/ min;柱溫范圍為10~30°C;進(jìn)樣量范圍為20~50化。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述檢測(cè)器為示差折光檢測(cè)器。11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述用流動(dòng)相溶解時(shí)采用超聲加速 并確保溶解完全； 所述過濾為采用0.2~Iwii水系過濾膜過濾，優(yōu)選0.45WI1。12. 權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法在檢測(cè)藥品或載藥醫(yī)療器械、食品、保健品 及其他生物制品中聚乙二醇含量或聚乙二醇?xì)埩袅恐械膽?yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種聚乙二醇含量的檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法利用樣品中各組分流體力學(xué)體積大小的不同，通過優(yōu)化色譜條件，選擇合適的色譜柱填料的粒徑和孔徑大小的體積排阻色譜柱實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)的分離，通過實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的通用檢測(cè)器，鑒別聚乙二醇的色譜峰，并通過外標(biāo)法回歸，進(jìn)而定量樣品中聚乙二醇的絕對(duì)含量。本發(fā)明的檢測(cè)方法解決了常規(guī)方法中分離度不佳，微量含量測(cè)試準(zhǔn)確度不高，測(cè)試結(jié)果只能以百分含量表達(dá)等的限制，特別適合于檢測(cè)藥品或載藥醫(yī)療器械、食品、保健品及其他生物制品中聚乙二醇含量或聚乙二醇?xì)埩袅俊?br>【IPC分類】G01N30/60, G01N30/74, G01N30/86
【公開號(hào)】CN105548422
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510980013
【發(fā)明人】宋精忠
【申請(qǐng)人】先健科技(深圳)有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2015年12月23日