MS樣品中，當(dāng)與其緩解期（即SPMS-NA和RRMS)進行比較時，發(fā) 明人發(fā)現(xiàn)在復(fù)發(fā)期SPMS( SPMS-A)樣品的血清中3HK顯著增加。這表明在疾病復(fù)發(fā)期間活化 的KP可能傾向于3HK的產(chǎn)生，并且可能導(dǎo)致其他神經(jīng)毒性QUIN的下游產(chǎn)生。
[0141]免疫組織化學(xué)研究
[0142]顯微鏡切片顯示在整個大腦、腦干和小腦具有廣泛的多發(fā)性脫髓鞘斑塊。額葉、顳 葉和枕葉皮質(zhì)內(nèi)的室周斑塊顯示完全脫髓鞘，并伴隨有血管周淋巴細胞成套（cuffing)的 存在，以及一定程度的反應(yīng)性神經(jīng)膠質(zhì)增生。在一些區(qū)域，斑塊似乎具有較長的壽命，顯示 無殘留的血管周淋巴細胞。不存在其他的顯著皮質(zhì)病理學(xué)。基底神經(jīng)節(jié)和間腦顯示出血管 周脫髓鞘斑塊的病灶區(qū)域。對基底神經(jīng)節(jié)的盧克斯固藍染色和結(jié)晶紫染色顯示出在MS情況 下觀察到的慢性斑塊和急性斑塊兩者。相較于在右側(cè)觀察到的正常髓鞘形成，所述染色(參 見圖3)示出了左側(cè)的廣泛脫髓鞘。HLA-DR顯示活化的小神經(jīng)膠質(zhì)細胞大量地浸潤到急性斑 塊的脫髓鞘區(qū)域。然而，在慢性斑塊中，如圖3B所示，不存在廣泛的小神經(jīng)膠質(zhì)細胞浸潤。
[0143] QUIN也存在于MS腦切片中。在由存在血管周淋巴細胞成套限定的急性斑塊中，在 神經(jīng)元細胞中觀察到QUIN的細胞質(zhì)表達(參見圖3C)。此外，在顯示急性斑塊之腦區(qū)域中的 腦實質(zhì)中發(fā)現(xiàn)呈斑點圖案的QUIN表達（圖4A)，但在慢性斑塊中未發(fā)現(xiàn)QUIN的染色（圖4B)。 急性斑塊中的QUIN同種型對照（圖3D)未顯示出QUIN的任何神經(jīng)元表達。此外，當(dāng)與對照腦 切片進行比較時（圖4C)，在灰質(zhì)和白質(zhì)中均未觀察到QUIN表達。然而，在正常腦組織的休眠 小神經(jīng)膠質(zhì)細胞中QUIN以基礎(chǔ)水平唯一且組成性地表達(圖4D)。
[0144] 表7-患有MS之對象的組織或體液中犬尿氨酸途徑化合物的水平。
[0146] 討論
[0147] 數(shù)據(jù)表明，神經(jīng)保護性KP代謝物（即KYNA和PIC)在MS的早期增加，但在進展型MS中 顯著降低。
[0148] QUIN在所有MS亞型中均增加。該增加與MS的進展相關(guān)，尤其在CNS和血清中。在疾 病的早期，相比較于對照，僅觀察到QUIN的適度增加。在進展型MS中，數(shù)據(jù)表明QUIN顯著升 尚。
[0149] 相比較于健康對照，3-羥基犬尿氨酸在所有MS亞型中均升高。特別地，3-羥基犬尿 氨酸水平在MS的復(fù)發(fā)期期間顯著增加，當(dāng)與MS緩解期（SPMS-非活動性）的3-羥基犬尿氨酸 水平進行比較時，這樣的增加在復(fù)發(fā)期（SPMS-活動性)期間3-羥基犬尿氨酸的升高水平中 是明顯的。
[0150] MS腦切片中的QUIN染色顯示，在急性斑塊形成的初始階段，有QUIN釋放到實質(zhì)中。 為了證明實質(zhì)中的QUIN表達不是由背景染色引起，建立對QUIN染色的同種型對照，并證明 在同種型對照中不存在QUIN染色。此外，據(jù)觀察，QUIN在無顯著神經(jīng)病理學(xué)的對照例的白質(zhì) 或灰質(zhì)中均不表達。
【主權(quán)項】
1. 方法，其用于在患有MS之對象中評價MS的嚴(yán)重程度，或者用于在患有MS之對象中監(jiān) 巧齡5的進展，或者用于監(jiān)測施用于患有MS之對象的治療的效果，所述方法包括將所述患有 MS之對象的組織或體液中一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平與所述一種或更多種 犬尿氨酸途徑化合物的參考值進行比較。2. 權(quán)利要求1所述的方法，其中所述參考值代表未患MS之對象的組織或體液中所述一 種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平。3. 權(quán)利要求1所述的方法，其中所述參考值代表患有預(yù)定嚴(yán)重程度MS之對象的組織或 體液中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平。4. 權(quán)利要求1所述的方法，其中所述參考值代表在較早時間所述患有MS之對象的組織 或體液中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平。5. 權(quán)利要求1至4中任一項所述的方法，其中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物選 自色氨酸、犬尿酸、3-徑基犬尿氨酸、化晚甲酸和哇嘟酸。6. 權(quán)利要求5所述的方法，其中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物為哇嘟酸，并且 所述MS的嚴(yán)重程度分類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)或進展型MS，其中進展型MS進一步分類為 繼發(fā)進展型MS(SPMS)、復(fù)發(fā)期繼發(fā)進展型MS(SPMS-A)、緩解期繼發(fā)進展型MS(SPMS-NA)或原 發(fā)進展型MS(PPMS)。7. 權(quán)利要求5所述的方法，其中一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物為化晚甲酸和/或犬 尿酸，并且所述MS的嚴(yán)重程度分類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)或進展型MS，其中進展型MS進一 步分類為繼發(fā)進展型MS(SPMS)、復(fù)發(fā)期繼發(fā)進展型MS(SPMS-A)、緩解期繼發(fā)進展型MS (SPMS-NA)或原發(fā)進展型MS(PPMS)。8. 權(quán)利要求5所述的方法，其中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物為3-徑基犬尿 氨酸，并且所述MS的嚴(yán)重程度分類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)或進展型MS，其中進展型MS進一 步分類為繼發(fā)進展型MS(SPMS)、復(fù)發(fā)期繼發(fā)進展型MS(SPMS-A)、緩解期繼發(fā)進展型MS (SPMS-NA)或原發(fā)進展型MS(PPMS)。9. 權(quán)利要求6所述的方法，其中第一參考值代表未患MS之對象的組織或體液中哇嘟酸 的水平，第二參考值代表來自患有繼發(fā)進展型（SPMS)之患者的組織或體液中哇嘟酸的水 平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中哇嘟酸的水平相對于所述第一參考值升 高且相對于所述第二參考值降低時，所述MS歸類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)。10. 權(quán)利要求7所述的方法，其中所述參考值代表未患MS之對象的組織或體液中化晚甲 酸或犬尿酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中化晚甲酸或犬尿酸的水 平相對于所述參考值升高時，所述MS歸類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)。11. 權(quán)利要求8所述的方法，其中所述參考值代表未患MS之對象的組織或體液中3-徑基 犬尿氨酸的水平，并且當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中3-徑基犬尿氨酸的水平相對于 所述參考值升高時，所述MS歸類為復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)、繼發(fā)進展型MS(SPMS)或原發(fā)進展 型MS(PPMS)。12. 權(quán)利要求6所述的方法，其中所述參考值代表患有復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)之對象的 組織或體液中哇嘟酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中哇嘟酸的水平 相對于所述參考值升高時，所述MS歸類為進展型。13. 權(quán)利要求7所述的方法，其中所述參考值代表患有復(fù)發(fā)-緩解型MS(RRMS)之對象的 組織或體液中化晚甲酸或犬尿酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中化 晚甲酸或犬尿酸的水平相對于所述參考值降低時，所述MS歸類為進展型MS。14. 權(quán)利要求8所述的方法，其中第一參考值代表未患MS之對象的組織或體液中3-徑基 犬尿氨酸的水平，第二參考值代表來自患有緩解期繼發(fā)進展型MS(SPMS-NA)或復(fù)發(fā)-緩解型 MS(RRMS)之患者的組織或體液中3-徑基犬尿氨酸的水平，并且第Ξ參考值代表患有復(fù)發(fā)期 繼發(fā)進展型MS(SPMS-A)之對象的組織或體液中3-徑基犬尿氨酸的水平，其中當(dāng)所述患有MS 之對象的組織或體液中3-徑基犬尿氨酸的水平相對于所述第一參考值升高且相對于所述 第二參考值降低時，所述MS歸類為緩解期繼發(fā)進展型MS(SPMS-NA)或復(fù)發(fā)緩解型MS(RRMS)。15. 權(quán)利要求5所述的方法，其中所述患有MS之對象的組織或體液中所述一種或更多種 犬尿氨酸途徑化合物的水平為下表中所示的比率：16. 權(quán)利要求6所述的方法，其中所述參考值代表患有SPMS之對象的組織或體液中哇嘟 酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中哇嘟酸的水平相對于所述參考值 升高時，所述MS歸類為PPMS。17. 權(quán)利要求7所述的方法，其中所述參考值代表患有SPMS之對象或未患MS之對象的組 織或體液中化晚甲酸或犬尿酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中化晚 甲酸或犬尿酸的水平相對于所述參考值降低時，所述MS歸類為PPMS。18. 權(quán)利要求5所述的方法，其中所述參考值代表未患MS之對象的組織或體液中色氨酸 的水平和化晚甲酸或犬尿酸的水平，并且其中當(dāng)所述患有MS之對象的組織或體液中色氨酸 的水平和化晚甲酸或犬尿酸的水平相對于所述參考值降低時，所述MS歸類為SPMS。19. 權(quán)利要求1所述的方法，其中所述組織或體液中所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化 合物的水平如下確定:取得所述患有MS之對象的組織或體液的樣品，并測定所述樣品中所 述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平。20. 權(quán)利要求19所述的方法，其中所述樣品為CSF或血清體液樣品。21. 預(yù)后試劑盒，其用于在患有MS之對象中評價MS的嚴(yán)重程度，或者用于在患有MS之對 象中監(jiān)測MS的進展，或者用于監(jiān)測施用于患有MS之對象的治療的效果，包括將所述患有MS 之對象的組織或體液中一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平與所述一種或更多種犬 尿氨酸途徑化合物的參考值進行比較。22. 權(quán)利要求21所述的預(yù)后試劑盒，其包含： (a)用于測定患者的生物樣品中一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物之水平的試劑；W 及 (b)使所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平與一個或更多個參考值相關(guān)聯(lián)w 評價患有MS之對象中MS嚴(yán)重程度的信息。23.權(quán)利要求22所述的預(yù)后試劑盒，其包括使用TRP、KYN、KYNA、3皿、PIC和QUIN單克隆 抗體的酶聯(lián)免疫吸附測定化LISA)測試。
【專利摘要】方法和預(yù)后試劑盒，其用于在患有MS之對象中評價MS的嚴(yán)重程度，或者用于在患有MS之對象中監(jiān)測MS的進展，或者用于監(jiān)測施用于患有MS之對象的治療的效果。在所述方法和預(yù)后試劑盒兩者中，將所述患有MS之對象的組織或體液中一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的水平與所述一種或更多種犬尿氨酸途徑化合物的參考值進行比較。
【IPC分類】G01N33/50, G01N33/564
【公開號】CN105556306
【申請?zhí)枴緾N201380079606
【發(fā)明人】吉勒斯·吉耶曼, 林才杰, 布魯斯·詹姆士·布魯
【申請人】得安體Ms有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2013年7月18日
【公告號】CA2918447A1, EP3022558A1, US20160161507, WO2015008111A1