l/L、l-亞硝基-2-萘酚10mmol/L、三乙醇胺0. lmol/ L、谷脫甘妝2mmo1/],和proclin300 0? 05mol/L。
[0023]實(shí)施例2、缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑 缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑包括試劑R1和試劑R2,所述試劑R1包括以下組分：pH值為7. 5的三羥甲基氨基甲烷緩沖液100mmol/L、氯化鈷50mmol/L、三乙醇胺2mol/ L和proclin300 0? lmol/L ; 所述試劑R2包括以下組分： pH值為8.0的MES緩沖液100mmol/L、1-亞硝基-2-萘酚35mmol/L、三乙醇胺2mol/L、谷月光甘妝Bmmol/],和proclin300 0? lmol/L。
[0024]實(shí)施例3、缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑 缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑包括試劑R1和試劑R2,所述試劑R1包括以下組分：pH值為8.0的三羥甲基氨基甲烷緩沖液150mmol/L、氯化鈷80mmol/L、三乙醇胺5mol/ L和proclin300 0? 2mol/L ; 所述試劑R2包括以下組分： pH值為8.5的MES緩沖液150mmol/L、1-亞硝基-2-萘酚50mmol/L、三乙醇胺5mol/ L、谷脫甘肽8mmo1/],和proclin300 0? 2mol/L。
[0025] 試驗(yàn)例一、鈷離子敏感度試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：氯化鈷（C〇Cl2)溶液、1-亞硝基-2-萘酚（NN)溶液、二硫蘇糖醇（DTT)溶 液和混合血清樣品。
[0026] 2、試驗(yàn)方法：將0)(：12溶液按不同的濃度稀釋，分成兩組，每組10支試管，每組按 稀釋順序加3mlCoCU容液，再分別加入0. 2ml混合血清樣品水浴6min，然后在第一組加 入1. 5g/LDTT溶液1. 0ml，測(cè)定其吸光度，測(cè)定波長(zhǎng)為570nm，在第二組加入0.lg/LNN溶液 1. 0ml，水浴6min后測(cè)定其吸光度，測(cè)定波長(zhǎng)為405nm。
[0027] 3、試驗(yàn)結(jié)果： 試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0028] 表1DTT溶液和NN溶液的吸光度數(shù)值比較
由表1可知，NN作為顯色劑能檢測(cè)到的CoCl2濃度為0. 40mg/L，而DTT作為顯色劑在C〇Cl2濃度為10. 00mg/L時(shí)才會(huì)有明顯的吸光度變化，證明NN作為顯色劑的敏感度高于 DTT，有利于提尚缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的準(zhǔn)確性。
[0029] 試驗(yàn)例二、缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：實(shí)施例2制備的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，混合血清樣品。
[0030] 2、試驗(yàn)方法：采用全自動(dòng)生化分析儀以兩點(diǎn)終點(diǎn)法進(jìn)行測(cè)定，將樣品與試劑混合， 經(jīng)過(guò)5-10min，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到平衡點(diǎn)時(shí)，檢測(cè)反應(yīng)后顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度?，F(xiàn)在批內(nèi)連續(xù)測(cè)定 混合血清樣品50次，計(jì)算出吸光度的均值，標(biāo)準(zhǔn)差，再將混合血清樣品分裝于-18°C冷藏， 將試劑分別放置于4°C冰箱，然后每天連續(xù)測(cè)定同一混合血清樣品，計(jì)算其差異，以±2s為 標(biāo)準(zhǔn)判斷是否失效，連續(xù)觀察10天。
[0031] 3、試驗(yàn)結(jié)果 首次測(cè)定50次的混合血清樣品的吸光度均值為0. 665,標(biāo)準(zhǔn)差為0. 030,10天內(nèi)的吸光 度值為表2所示。
[0032] 表2混合血清的吸光度值_
由表2得出，本發(fā)明提供的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑檢測(cè)混合血清樣品的吸光度值在 10天沒有超出范圍，證明本發(fā)明的缺血修飾白蛋白檢測(cè)具有很好的穩(wěn)定性。
[0033] 試驗(yàn)例三、缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的重復(fù)性試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：實(shí)施例2制備的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，混合血清樣品。
[0034] 2、試驗(yàn)方法：采用全自動(dòng)生化分析儀以兩點(diǎn)終點(diǎn)法進(jìn)行測(cè)定，將樣品與試劑混合， 經(jīng)過(guò)5-10min，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到平衡點(diǎn)時(shí)，檢測(cè)反應(yīng)后顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度。將血清混合樣品分 裝成30份，放于-20°C冰箱保存，每天測(cè)定2批，每批測(cè)定2次，測(cè)定30天，計(jì)算出批內(nèi)和批 間的標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。
[0035] 3、試驗(yàn)結(jié)果 試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。
[0036] 表3缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的批內(nèi)和批間標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)
由表3得出，本發(fā)明提供的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑檢測(cè)的批內(nèi)和批間的變異系數(shù)小 于5%，證明本發(fā)明的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的測(cè)定結(jié)果具有良好的重復(fù)性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，該檢測(cè)試劑包括試劑Rl和試劑R2,所 述試劑Rl包括以下組分： 三羥甲基氨基甲烷緩沖液80-150mmol/L、氯化鈷40-80mmol/L、三乙醇胺0. l-5mol/L 和防腐劑 〇. 05-0. 3mol/L ; 所述試劑R2包括以下組分： MES 緩沖液 80-150mmol/L、1-亞硝基-2-萘酚 10-50mmol/L、三乙醇胺 0? l-5mol/L、谷 胱甘肽 2-10mmol/L 和防腐劑 0. 05-0. 3mol/L。2. 如權(quán)利要求1所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，該檢測(cè)試劑包括試劑 Rl和試劑R2,所述試劑Rl包括以下組分： 三羥甲基氨基甲烷緩沖液lOOmmol/L、氯化鈷50mmol/L、三乙醇胺2mol/L和防腐劑 0.lmol/L ； 所述試劑R2包括以下組分： MES緩沖液100mmol/L、l-亞硝基-2-萘酚35mmol/L、三乙醇胺2mol/L、谷胱甘肽 Bmmol /],和防腐劑 0? lmol/L〇3. 如權(quán)利要求1或2所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，所述三羥甲基氨基 甲烷緩沖液的pH值為7. 0-8. 0。4. 如權(quán)利要求3所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，所述三羥甲基氨基甲 烷緩沖液的pH值為7. 5。5. 如權(quán)利要求1或2所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，所述MES緩沖液的 pH 值為 7. 5-8. 5。6. 如權(quán)利要求5所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，所述MES緩沖液的pH 值為8.0。7. 如權(quán)利要求1或2所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑，其特征在于，所述防腐劑為 proclin300〇8. -種如權(quán)利要求1-7任一所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在 于，包括以下步驟： 采用全自動(dòng)生化分析儀以兩點(diǎn)終點(diǎn)法進(jìn)行測(cè)定，將樣品與試劑混合，經(jīng)過(guò)5-10min，當(dāng) 反應(yīng)達(dá)到平衡點(diǎn)時(shí)，檢測(cè)反應(yīng)后顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度，以此計(jì)算樣品的濃度。9. 如權(quán)利要求8所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，所述試劑 Rl與試劑R2的體積比為6:1。10. 如權(quán)利要求8所述的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，所述全自 動(dòng)生化分析儀的主波長(zhǎng)為505nm，次波長(zhǎng)為660nm。
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑及其檢測(cè)方法。該檢測(cè)試劑包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1主要由三羥甲基氨基甲烷緩沖液、氯化鈷、三乙醇胺和防腐劑組成；所述試劑R2主要由MES緩沖液、1-亞硝基-2-萘酚、三乙醇胺、谷胱甘肽和防腐劑組成。本發(fā)明提供的缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑鈷離子檢測(cè)敏感度高，檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性好，穩(wěn)定性好，而且價(jià)格便宜，易于保存，是一種理想的缺血修飾白蛋白的檢測(cè)試劑，有利于該缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑的臨床應(yīng)用。
【IPC分類】G01N21/79
【公開號(hào)】CN105021609
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510388708
【發(fā)明人】燕啟江
【申請(qǐng)人】廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司
【公開日】2015年11月4日
【申請(qǐng)日】2015年7月6日