其他與一相同。
【具體實施方式】 [0026] 三:本實施方式與一或二不同的是:步驟三中離心轉(zhuǎn) 速為1500rpm。其他與一或二相同。
【具體實施方式】 [0027] 四:本實施方式與一至三之一不同的是:步驟三中離 心時間為50min。其他與一至三之一相同。
【具體實施方式】 [0028] 五:本實施方式與一至四之一不同的是:步驟三中pH 值為7. 5。其他與一至四之一相同。
[0029] 通過以下實施例驗證本發(fā)明的有益效果:
[0030] 實施例一:一種Mn+離子配位沉淀法純化蘋果多酚的方法是通過以下步驟進行的:
[0031] -、原料預(yù)處理:將新鮮的蘋果切成Icm3的小塊,在溫度為80°C的水中漂燙8s~ IOs后破碎得到勻漿;
[0032] 二、微波輔助粗提?。簩?g步驟一得到的勻漿加入到70mL質(zhì)量濃度為50%的乙 醇中,然后在微波功率為640W的條件下進行粗提取,粗提取的時間為70s,得到蘋果多酚粗 提取液;所述蘋果多酚粗提取液中蘋果多酚的含量為9. 92mg/g ;
[0033] 三、將50mL步驟二得到的蘋果多酚粗提取液采用質(zhì)量濃度為1%~5%的氨水將 pH值從3. 8~4. 5調(diào)整至7. 5,得到調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提取液;向調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提 取液中投加〇? Ig~I. 4g ZnCl3,然后在離心轉(zhuǎn)速為1500rpm、離心時間為50min和pH值為 7. 5的條件下進行離心,靜置lOmin,得到純化后的蘋果多酚沉淀物;
[0034] 四、沉淀物轉(zhuǎn)溶提?。簩⒉襟E三得到的純化后的蘋果多酚沉淀物加入到濃度為 lmol/L的鹽酸中至沉淀物完全溶解,得到轉(zhuǎn)溶后的蘋果多酚樣液,然后再向轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液中加入乙酸乙酯萃取,冷凍干燥得到棕紅色粉末狀蘋果多酚;所述轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液與乙酸乙酯的體積比為1:1。
[0035] 圖1為不同ZnCl3添加量與蘋果多酚沉淀率的關(guān)系曲線;由圖1可知,蘋果多酚沉 淀率與ZnCl^添加量呈正比例關(guān)系,說明ZnCl 3含量越高,多酚沉淀率越大,在ZnCl 3的添 加量為0. 1~0. 4g范圍內(nèi),隨著ZnCl3的增加,蘋果多酚沉淀率快速增大,此后,蘋果多酚沉 淀率仍隨ZnClJ^添加量而增大,但增加速率逐漸變得緩慢最后趨于穩(wěn)定,說明當(dāng)ZnCl 3的 添加量達到I. 2g左右時,蘋果多酚沉淀率值趨于穩(wěn)定,說明粗提液中的蘋果多酚已純化的 比較完全。
[0036] 實施例二:一種Mn+離子配位沉淀法純化蘋果多酚的方法是通過以下步驟進行的:
[0037] -、原料預(yù)處理:將新鮮的蘋果切成Icm3的小塊,在溫度為80°C的水中漂燙8s~ IOs后破碎得到勻漿;
[0038] 二、微波輔助粗提?。簩?g步驟一得到的勻漿加入到70mL質(zhì)量濃度為50%的乙 醇中,然后在微波功率為640W的條件下進行粗提取,粗提取的時間為70s,得到蘋果多酚粗 提取液;所述蘋果多酚粗提取液中蘋果多酚的含量為9. 92mg/g ;
[0039] 三、將50mL步驟二得到的蘋果多酚粗提取液采用質(zhì)量濃度為1%~5%的氨水將 pH值從3. 8~4. 5調(diào)整至5~9,得到調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提取液;向調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗 提取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在離心轉(zhuǎn)速為1500rpm、離心時間為50min和pH值為5~9 的條件下進行離心,靜置l〇min,得到純化后的蘋果多酚沉淀物;
[0040] 四、沉淀物轉(zhuǎn)溶提?。簩⒉襟E三得到的純化后的蘋果多酚沉淀物加入到濃度為 lmol/L的鹽酸中至沉淀物完全溶解,得到轉(zhuǎn)溶后的蘋果多酚樣液,然后再向轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液中加入乙酸乙酯萃取,冷凍干燥得到棕紅色粉末狀蘋果多酚;所述轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液與乙酸乙酯的體積比為1:1。
[0041] 圖2為不同pH值與蘋果多酚沉淀率的關(guān)系曲線;由圖2可知,隨著pH的增大,樣 品溶液環(huán)境逐漸由酸性到中性,蘋果多酚與金屬離子配位產(chǎn)生沉淀,蘋果多酚沉淀率由少 至多,蘋果多酚逐漸從粗提液中純化出來,當(dāng)PH值等于7. 5,樣液環(huán)境達到中性稍偏堿后, 蘋果多酚沉淀率達到最大值。隨著pH值的繼續(xù)增加,樣液逐漸偏堿性,隨著堿性的增大, 蘋果多酚沉淀率減少,說明強堿性環(huán)境會破壞蘋果多酚與Zn 3+離子配位產(chǎn)生的酚鹽類沉淀 結(jié)。因此無論樣液環(huán)境過酸或者過堿都不利蘋果多酚與金屬離子配位產(chǎn)生沉淀。中性偏堿 的環(huán)境才可獲得最大的蘋果多酚沉淀率。
[0042] 實施例三:一種Mn+離子配位沉淀法純化蘋果多酚的方法是通過以下步驟進行的:
[0043] -、原料預(yù)處理:將新鮮的蘋果切成Icm3的小塊,在溫度為80°C的水中漂燙8s~ IOs后破碎得到勻漿;
[0044] 二、微波輔助粗提取:將5g步驟一得到的勻漿加入到70mL質(zhì)量濃度為50%的乙 醇中,然后在微波功率為640W的條件下進行粗提取,粗提取的時間為70s,得到蘋果多酚粗 提取液;所述蘋果多酚粗提取液中蘋果多酚的含量為9. 92mg/g ;
[0045] 三、將50mL步驟二得到的蘋果多酚粗提取液采用質(zhì)量濃度為1%~5%的氨水將 pH值從3. 8~4. 5調(diào)整至7. 5,得到調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提取液;向調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提 取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在離心轉(zhuǎn)速為500~4000rpm、離心時間為50min和pH值為 7. 5的條件下進行離心,靜置lOmin,得到純化后的蘋果多酚沉淀物;
[0046] 四、沉淀物轉(zhuǎn)溶提取:將步驟三得到的純化后的蘋果多酚沉淀物加入到濃度為 lmol/L的鹽酸中至沉淀物完全溶解,得到轉(zhuǎn)溶后的蘋果多酚樣液,然后再向轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液中加入乙酸乙酯萃取,冷凍干燥得到棕紅色粉末狀蘋果多酚;所述轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液與乙酸乙酯的體積比為1:1。
[0047] 圖3為不同離心轉(zhuǎn)速與蘋果多酚沉淀率的關(guān)系曲線;由圖3可知,離心速率對蘋 果多酚沉淀率的影響較明顯,在離心轉(zhuǎn)速為500~1500rpm范圍內(nèi),隨著轉(zhuǎn)速的增加,蘋果 多酚沉淀率增加,說明增加離心轉(zhuǎn)速,可以促進粗提液中的蘋果多酚與溶液中的Zn 3+配位 產(chǎn)生沉淀,但隨著離心轉(zhuǎn)速的增加蘋果多酚沉淀率減少,說明離心轉(zhuǎn)速過大,會使環(huán)境不穩(wěn) 定性增強,使剛剛生成的蘋果多酚沉淀在物理作用下被破壞分解,令樣液內(nèi)的沉淀減少。因 此,離心轉(zhuǎn)速不宜過大。
[0048] 實施例四:一種Mn+離子配位沉淀法純化蘋果多酚的方法是通過以下步驟進行的:
[0049] -、原料預(yù)處理:將新鮮的蘋果切成Icm3的小塊,在溫度為80°C的水中漂燙8s~ IOs后破碎得到勻漿;
[0050] 二、微波輔助粗提?。簩?g步驟一得到的勻漿加入到70mL質(zhì)量濃度為50%的乙 醇中,然后在微波功率為640W的條件下進行粗提取,粗提取的時間為70s,得到蘋果多酚粗 提取液;所述蘋果多酚粗提取液中蘋果多酚的含量為9. 92mg/g ;
[0051] 三、將50mL步驟二得到的蘋果多酚粗提取液采用質(zhì)量濃度為1%~5%的氨水將 pH值從3. 8~4. 5調(diào)整至7. 5,得到調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗提取液;向調(diào)節(jié)后的蘋果多酚粗 提取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在離心轉(zhuǎn)速為1500rpm、離心時間為10~70min和pH值為 7. 5的條件下進行離心,靜置lOmin,得到純化后的蘋果多酚沉淀物;
[0052] 四、沉淀物轉(zhuǎn)溶提?。簩⒉襟E三得到的純化后的蘋果多酚沉淀物加入到濃度為 lmol/L的鹽酸中至沉淀物完全溶解,得到轉(zhuǎn)溶后的蘋果多酚樣液,然后再向轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液中加入乙酸乙酯萃取,冷凍干燥得到棕紅色粉末狀蘋果多酚;所述轉(zhuǎn)溶后的蘋果 多酚樣液與乙酸乙酯的體積比為1:1。
[0053] 圖4不同離心時間與蘋果多酚沉淀率的關(guān)系曲線;由圖4可知,蘋果多酚沉淀率與 離心時間大致呈正比例關(guān)系,隨著離心時間的增加,蘋果多酚沉淀率增加,說明反應(yīng)時間的 延長會促進酚鹽沉淀的生成,當(dāng)離心時間為50min,蘋果多酚沉淀率最大,隨后,蘋果多酚沉 淀率隨離心時間的增加略有減少后逐步趨于穩(wěn)定,說明此時粗提液中的AP已純化的比較 完全,增加反應(yīng)時間,對蘋果多酚沉淀率已無太大影響。
[0054] 實施例五:一種Mn+離子配位沉淀法純化蘋果多酚的方法是通過以下步驟進行的:
[0055] -、原料預(yù)處理:將新鮮的蘋果切成Icm3的小塊,在溫度為80°C的水中漂燙8s~ IOs后破碎得到勻漿;
[0056] 二、微波輔助粗提取:將5g步驟一得到的勻漿加入到70mL質(zhì)量濃度為50%的乙 醇中,然后在微波功率為640W的條件下進行粗提取,粗提取的時間為70s,得到蘋果多酚粗 提取液;所述蘋果多酚粗提取液中蘋果多酚的含量為9. 92mg/g ;
[0057] 三、將50mL步驟二得到的蘋果多酚粗提取液采用質(zhì)量濃度為1%~5%的氨水將 pH值從3. 8~