溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫, 收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液,乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至 在20°C相對(duì)密度為1. 05至1. 20的稠膏,然后干燥后得到香青蘭提取物。
[0016] 下面是對(duì)上述發(fā)明技術(shù)方案之二的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn): 上述香青蘭為香青蘭地上部分,香青蘭藥材粉為香青蘭粗最粗粉。
[0017] 上述第一步中,香青蘭藥材粉用水或體積百分比為40%的乙醇水溶液回流提取1 次,回流提取溫度為30°C至70°C,回流提取時(shí)間為5h,回流提取時(shí)水或乙醇水溶液的量為 香青蘭藥材粉重量的50倍;或/和,第二步中,將提取混合液濃縮至香青蘭藥材粉重量的 20倍后得到第一濃縮液,在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液,混合液中乙醇的質(zhì)量 百分含量為70%,在溫度為4°C下靜置24h,靜置后過濾,濾液濃縮至香青蘭藥材粉重量的 10倍后得到第二濃縮液;或/和,第三步中,大孔吸附樹脂為HPD600或HPD826或XDA-6或 LX-11 或LX-17。
[0018] 上述第三步中,大孔吸附樹脂為LX-11;或/和,第三步中,用4倍柱體積的去離子 水對(duì)大孔樹脂進(jìn)行洗脫,水洗后棄去水洗液,再用5倍柱體積的體積百分比為8%的乙醇水 溶液進(jìn)行乙醇一次洗脫,洗脫后棄去乙醇一次洗脫液,然后用5倍柱體積的體積百分比為 30%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫,最后用5倍柱體積的體積百分比為60%的乙醇水溶液 進(jìn)行乙醇三次洗脫,收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液,乙醇二次洗脫液和乙醇三次 洗脫液混合后濃縮至在20°C相對(duì)密度為1. 20的稠膏,然后干燥后得到香青蘭提取物;或/ 和,第三步中,干燥溫度為50 °C至70 °C,干燥時(shí)間為6h至10h;或/和,第三步中,干燥溫度 為60°C,干燥時(shí)間為8h。
[0019] 本發(fā)明的技術(shù)方案之三是通過以下措施來實(shí)現(xiàn)的:一種香青蘭提取物作為制備治 療冠心病、動(dòng)脈硬化和心絞痛藥物的應(yīng)用。
[0020] 本發(fā)明香青蘭提取物中總黃酮含量較現(xiàn)有香青蘭提取物中總黃酮含量有較大幅 度提高;同時(shí)本發(fā)明香青蘭提取物高劑量組和中劑量組對(duì)心肌缺血的療效較益心巴迪然吉 布亞顆粒好,說明本發(fā)明香青蘭提取物對(duì)大鼠心肌缺血性損傷產(chǎn)生一定的保護(hù)作用,本發(fā) 明香青蘭提取物中劑量組和低劑量組的服用劑量僅為益心巴迪然吉布亞顆粒服用劑量的 25%和12. 5%,從而大大降低了服用量。
【附圖說明】
[0021] 附圖1為本發(fā)明香青蘭提取物HPLC色譜圖(附圖中1號(hào)峰為木犀草 素葡萄糖醛酸苷色譜峰、2號(hào)峰為芹菜素-7-O-f-D-葡萄糖醛酸苷色譜峰、3 號(hào)峰為迷迭香酸色譜峰、4號(hào)峰為香葉木素-7-O-f-D-葡萄糖醛酸苷色譜峰、5號(hào)峰為田薊 苷色譜峰、6號(hào)峰為刺槐素-7-O-f-D-葡萄糖醛酸苷色譜峰)。
[0022] 附圖2為現(xiàn)有技術(shù)木犀草素-7- -D-葡萄糖醛酸苷對(duì)照品HPLC色譜圖(與附 圖1中1號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
[0023] 附圖3為現(xiàn)有技術(shù)芹菜素-7- -D-葡萄糖醛酸苷對(duì)照品HPLC色譜圖(與附圖 1中2號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
[0024] 附圖4為現(xiàn)有技術(shù)迷迭香酸對(duì)照品HPLC色譜圖(與附圖1中3號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
[0025] 附圖5為現(xiàn)有技術(shù)香葉木素-7-f々-D-葡萄糖醛酸苷對(duì)照品HPLC色譜圖(與附 圖1中4號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
[0026] 附圖6為現(xiàn)有技術(shù)田薊苷對(duì)照品HPLC色譜圖(與附圖1中5號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
[0027] 附圖7為現(xiàn)有技術(shù)刺槐素-7-f々-D-葡萄糖醛酸苷對(duì)照品HPLC色譜圖(與附圖 1中6號(hào)峰相對(duì)應(yīng))。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制,可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實(shí)際情況來確定具體 的實(shí)施方式。
[0029] 實(shí)施例1,該香青蘭提取物,香青蘭提取物中木犀草素匍萄糖酸酸 苷的質(zhì)量百分含量為8. 0%至9. 0%、芹菜素-7-O-f-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為 2. 0%至3. 0%、迷迭香酸的質(zhì)量百分含量為8. 0%至11. 3%、香葉木素-7-O-f-D-葡萄糖 醛酸苷的質(zhì)量百分含量為7. 0%至8. 6%、田薊苷的質(zhì)量百分含量為13. 0%至17. 0%、刺槐 素葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量10. 0%至13. 5%;總黃酮的質(zhì)量百分含量為 50. 3%至 58. 5%。
[0030] 實(shí)施例2,該香青蘭提取物按下述制備方法得到:第一步,取適量香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉,香青蘭藥材粉用水或體積百分比為30%至60%的乙醇水溶液回流提取1 次至2次,每次回流提取溫度為30°C至70°C,每次回流提取時(shí)間為3h至6h,每次回流提取 時(shí)水或乙醇水溶液的量為香青蘭藥材粉重量的30倍至60倍,回流提取后合并提取液得到 提取混合液;第二步,將提取混合液濃縮至香青蘭藥材粉重量的5倍至25倍后得到第一濃 縮液,在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液,混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為50%至 80%,在溫度為0°C至4°C下靜置12h至24h,靜置后過濾,濾液濃縮至香青蘭藥材粉重量的8 倍至15倍后得到第二濃縮液;第三步,將0. 5倍至1. 5倍柱體積的第二濃縮液通過大孔樹 脂進(jìn)行吸附,吸附后棄去吸附殘液,接著用2倍至7倍柱體積的去離子水對(duì)大孔樹脂進(jìn)行洗 脫,水洗后棄去水洗液,再用2倍至6倍柱體積的體積百分比為2%至8%的乙醇水溶液進(jìn)行 乙醇一次洗脫,洗脫后棄去乙醇一次洗脫液,然后用4倍至10倍柱體積的體積百分比為20% 至40%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫,最后用4倍至10倍柱體積的體積百分比為50%至 80%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫,收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液,乙醇二次洗 脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至在20°C相對(duì)密度為1. 05至1. 20的稠膏,然后干燥后 得到香青蘭提取物。
[0031] 實(shí)施例3,作為上述實(shí)施例的優(yōu)化,香青蘭為香青蘭地上部分,香青蘭藥材粉為香 青蘭最粗粉。
[0032] 實(shí)施例4,作為上述實(shí)施例的優(yōu)化,第一步中,香青蘭藥材粉用水或體積百分比為 40%的乙醇水溶液回流提取1次,回流提取溫度為30°C至70°C,回流提取時(shí)間為5h,回流提 取時(shí)水或乙醇水溶液的量為香青蘭藥材粉重量的50倍;或/和,第二步中,將提取混合液 濃縮至香青蘭藥材粉重量的20倍后得到第一濃縮液,在第一濃縮液中加入無水乙醇得到 混合液,混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為70%,在溫度為4°C下靜置24h,靜置后過濾,濾液 濃縮至香青蘭藥材粉重量的10倍后得到第二濃縮液;或/和,第三步中,大孔吸附樹脂為 HPD600或HPD826或XDA-6或LX-11 或LX-17。
[0033] 實(shí)施例5,作為上述實(shí)施例的優(yōu)化,第三步中,大孔吸附樹脂為LX-11;或/和,第 三步中,用4倍柱體積的去離子水對(duì)大孔樹脂進(jìn)行洗脫,水洗后棄去水洗液,再用5倍柱體 積的體積百分比為8%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇一次洗脫,洗脫后棄去乙醇一次洗脫液,然后 用5倍柱體積的體積百分比為30%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫,最后用5倍柱體積的 體積百分比為60%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫,收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫 液,乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至在20°C相對(duì)密度為1. 20的稠膏,然后 干燥后得到香青蘭提取物;或/和,第三步中,干燥溫度為50°C至70°C,干燥時(shí)間為6h至 10h;或/和,第三步中,干燥溫度為60°C,干燥時(shí)間為8h。
[0034] 實(shí)施例6,該香青蘭提取物按下述制備方法得到:第一步,取50g香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉,香青蘭藥材粉用體積百分比為40%的乙醇水溶液回流提取1次,回流提 取溫度為50°C,回流提取時(shí)間為6h,回流提取時(shí)乙醇水溶液的量為香青蘭藥材粉重量的 40倍,回流提取后得到提取液;第二步,將提取液濃縮至香青蘭藥材粉重量的20倍后得到 第一濃縮液,在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液,混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為 70%,在溫度為4°C下靜置24h,靜置后過濾,濾液濃縮至香青蘭藥材粉重量的10倍后得到 第二濃縮液;第三步,將1. 5倍柱體積的第二濃縮液通過大孔樹脂進(jìn)行吸附,吸附后棄去吸 附殘液,接著用4倍柱體積的去離子水對(duì)大孔樹脂進(jìn)行洗脫,水洗后棄去水洗液,再用5倍 柱體積的體積百分比為5%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇一次洗脫,洗脫后棄去乙醇一次洗脫液, 然后