用5倍柱體積的體積百分比為30%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫，最后用7倍柱體 積的體積百分比為60%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫，收集乙醇二次洗脫液和乙醇三 次洗脫液，乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至在20°C相對密度為1. 20的稠 膏，然后在溫度為60°C下干燥8h，干燥后得到香青蘭提取物。本實(shí)施例中大孔吸附樹脂為 LX-11。本實(shí)施例的香青蘭提取物中木犀草素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為 8. 0%、芹菜素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為3. 0%、迷迭香酸的質(zhì)量百分含量 為10. 5%、香葉木素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為7. 0%、田薊苷的質(zhì)量百分 含量為17. 0%、刺槐素葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為13. 0%、總黃酮的質(zhì)量百 分含量為57. 5%。
[0035] 實(shí)施例7,該香青蘭提取物按下述制備方法得到：第一步，取50g香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉，香青蘭藥材粉用體積百分比為50%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流 提取溫度為70°C，第一次回流提取時(shí)間為3h、第二次回流提取時(shí)間為2h，每次回流提取時(shí) 乙醇水溶液的量為香青蘭藥材粉重量的40倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第 二步，將提取混合液濃縮至香青蘭藥材粉重量的15倍后得到第一濃縮液，在第一濃縮液中 加入無水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為70%，在溫度為4°C下靜置24h， 靜置后過濾，濾液濃縮至香青蘭藥材粉重量的10倍后得到第二濃縮液；第三步，將1倍柱體 積的第二濃縮液通過大孔樹脂進(jìn)行吸附，吸附后棄去吸附殘液，接著用4倍柱體積的去離 子水對大孔樹脂進(jìn)行洗脫，水洗后棄去水洗液，再用3倍柱體積的體積百分比為7%的乙醇 水溶液進(jìn)行乙醇一次洗脫，洗脫后棄去乙醇一次洗脫液，然后用5倍柱體積的體積百分比 為35%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫，最后用5倍柱體積的體積百分比為70%的乙醇水 溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫，收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液，乙醇二次洗脫液和乙醇 三次洗脫液混合后濃縮至在20°C相對密度為1. 18的稠膏，然后在溫度為60°C下干燥7h，干 燥后得到香青蘭提取物。本實(shí)施例中大孔吸附樹脂為HPD826。本實(shí)施例的香青蘭提取物中 木犀草素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為8. 5%、芹菜素-7-O-0-D-葡萄糖醛 酸苷的質(zhì)量百分含量為2. 0%、迷迭香酸的質(zhì)量百分含量為8. 0%、香葉木素-7-0-0-D-葡萄 糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為8. 0%、田薊苷的質(zhì)量百分含量為14. 0%、刺槐素-7-ff-D-葡 萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為10. 〇%、總黃酮的質(zhì)量百分含量為55%。
[0036] 實(shí)施例8,該香青蘭提取物按下述制備方法得到：第一步，取50g香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉，香青蘭藥材粉用體積百分比為30%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提 取溫度為50°C，回流提取時(shí)間為4h，回流提取時(shí)乙醇水溶液的量為香青蘭藥材粉重量的 40倍，回流提取后得到提取液；第二步，將提取液濃縮至香青蘭藥材粉重量的22倍后得到 第一濃縮液，在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為 70%，在溫度為4°C下靜置22h，靜置后過濾，濾液濃縮至香青蘭藥材粉重量的12倍后得到第 二濃縮液；第三步，將1. 1柱體積的第二濃縮液通過大孔樹脂進(jìn)行吸附，吸附后棄去吸附殘 液，接著用4倍柱體積的去離子水對大孔樹脂進(jìn)行洗脫，水洗后棄去水洗液，再用6倍柱體 積的體積百分比為4%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇一次洗脫，洗脫后棄去乙醇一次洗脫液，然后 用5倍柱體積的體積百分比為20%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇二次洗脫，最后用5倍柱體積的 體積百分比為60%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫，收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫 液，乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至在20°C相對密度為1. 18的稠膏，然后 在溫度為60°C下干燥8h，干燥后得到香青蘭提取物。本實(shí)施例中大孔吸附樹脂為XDA-6。 本實(shí)施例的香青蘭提取物中木犀草素葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為8. 2%、 芹菜素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為2. 3%、迷迭香酸的質(zhì)量百分含量為 8. 0%、香葉木素-7-0-0-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為7. 5%、田薊苷的質(zhì)量百分含量 為13. 1%、刺槐素葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為12. 0%、總黃酮的質(zhì)量百分含 量為53%。
[0037] 實(shí)施例9,該香青蘭提取物按下述制備方法得到：第一步，取50g香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉，香青蘭藥材粉用體積百分比為45%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流 提取溫度為50°C，每次回流提取時(shí)間為2. 5h，每次回流提取時(shí)乙醇水溶液的量為香青蘭藥 材粉重量的50倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，將提取混合液濃縮至 香青蘭藥材粉重量的20倍后得到第一濃縮液，在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液， 混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為70%，在溫度為4°C下靜置24h，靜置后過濾，濾液濃縮至香 青蘭藥材粉重量的15倍后得到第二濃縮液；第三步，將1. 3倍柱體積的第二濃縮液通過大 孔樹脂進(jìn)行吸附，吸附后棄去吸附殘液，接著用4倍柱體積的去離子水對大孔樹脂進(jìn)行洗 脫，水洗后棄去水洗液，再用5倍柱體積的體積百分比為6%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇一次洗 脫，洗脫后棄去乙醇一次洗脫液，然后用5倍柱體積的體積百分比為35%的乙醇水溶液進(jìn)行 乙醇二次洗脫，最后用6倍柱體積的體積百分比為65%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫，收 集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液，乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至在 20°C相對密度為1. 18的稠膏，然后在溫度為60°C下干燥8h，干燥后得到香青蘭提取物。本 實(shí)施例中大孔吸附樹脂為LX-17。本實(shí)施例的香青蘭提取物中木犀草素-7-(9-0-D-匍萄糖 醛酸苷的質(zhì)量百分含量為9. 0%、芹菜素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為2. 0%、 迷迭香酸的質(zhì)量百分含量為11. 3%、香葉木素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為 8. 5%、田薊苷的質(zhì)量百分含量為13. 3%、刺槐素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量 為13. 5%、總黃酮的質(zhì)量百分含量為57%。
[0038] 實(shí)施例10,該香青蘭提取物按下述制備方法得到：第一步，取50g香青蘭粉碎后得 到香青蘭藥材粉，香青蘭藥材粉用體積百分比為60%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流 提取溫度為50°C，每次回流提取時(shí)間為1. 5h，每次回流提取時(shí)乙醇水溶液的量為香青蘭藥 材粉重量的60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，將提取混合液濃縮至 香青蘭藥材粉重量的6倍后得到第一濃縮液，在第一濃縮液中加入無水乙醇得到混合液， 混合液中乙醇的質(zhì)量百分含量為50%，在溫度為0°C下靜置12h，靜置后過濾，濾液濃縮至香 青蘭藥材粉重量的15倍后得到第二濃縮液；第三步，將0. 5倍柱體積的第二濃縮液通過大 孔樹脂進(jìn)行吸附，吸附后棄去吸附殘液，接著用4倍柱體積的去離子水對大孔樹脂進(jìn)行洗 脫，水洗后棄去水洗液，再用6倍柱體積的體積百分比為5%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇一次洗 脫，洗脫后棄去乙醇一次洗脫液，然后用5倍柱體積的體積百分比為25%的乙醇水溶液進(jìn) 行乙醇二次洗脫，最后用6倍柱體積的體積百分比為70%的乙醇水溶液進(jìn)行乙醇三次洗脫， 收集乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液，乙醇二次洗脫液和乙醇三次洗脫液混合后濃縮至 在20°C相對密度為1. 10的稠膏，然后在溫度為60°C下干燥8h，干燥后得到香青蘭提取物。 本實(shí)施例中大孔吸附樹脂為HPD600。本實(shí)施例的香青蘭提取物中木犀草素匍 萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為8. 0%、芹菜素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含量為 2. 1%、迷迭香酸的質(zhì)量百分含量為8. 2%、香葉木素-7-ff-D-葡萄糖醛酸苷的質(zhì)量百分含 量為7. 0%、田薊苷的質(zhì)量百分含量為13. 0%、刺槐素-7-ff-D-葡萄糖醛酸的質(zhì)量百分含 量為12. 0%、總黃酮的質(zhì)量百分含量為51%。
[0039] 本發(fā)明上述實(shí)施例得到的香青蘭提取物中各組分的含量按下述方法測定： (1)本發(fā)明香青蘭提取物中木犀草素-7-0-0-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7- -D-葡 萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香葉木素葡萄糖醛酸苷、田薊苷和刺槐 素-7-^-0-D-葡萄糖醛酸苷的高效液相測定方法：