，多粘菌素Β)， 抗病毒藥品（例如阿昔洛韋），抗真菌藥品（例如氟康唑），止痛劑和抗炎藥品（例如非甾 類抗炎藥品，局部留類化合物，環(huán)孢霉素和抗過(guò)敏藥品）。
[0117] 因此，在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供了藥物組合物，其包含：
[0118] (a)血管緊縮素肽；
[0119] (b)活性試劑，其選自：人工淚液（例如羧甲纖維素，羥乙基纖維素，羥丙甲纖維 素，聚乙烯醇，環(huán)糊精），抗生素（例如氯霉素，環(huán)丙沙星，慶大霉素，新霉素，多粘菌 素B)，抗病毒藥品（例如阿昔洛韋），抗真菌藥品（例如氟康唑），止痛劑和抗炎藥品（例 如非留類抗炎藥品，局部留類化合物，環(huán)孢霉素和抗過(guò)敏藥品）；以及
[0120] (c)藥物可接受的載體。
[0121] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的活性試劑包含人工淚液（例如羧甲纖維素，羥乙基纖 維素，羥丙甲纖維素，聚乙烯醇，環(huán)糊精）。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血管緊縮素肽包含或由 Nle3-A(l-7)(SEQIDN0:14)組成。
[0122] 血管緊縮素肽可以根據(jù)所有相應(yīng)因素測(cè)定的任何合適的劑量存在于藥物組合物 中，其中所述的因素包括上文中本發(fā)明的方法中公開(kāi)的那些。藥物組合物可以制備成通過(guò) 任何合適的途徑給予，例如系統(tǒng)給予（包括口服給藥）；局部給予，包括但不限于滴劑（即， 處于懸液、溶液或者作為油膏），使用繃帶型角膜接觸鏡，通過(guò)角膜接觸鏡而持續(xù)地傳遞， formix-基移植術(shù)，或者使用眼貼或貼眼劑。局部藥物組合物可以包含例如選自以下的配制 物：水凝膠，乳膏，粘彈劑，軟膏，糊劑，滴劑（懸液或處于溶液中），納米顆粒，聚合物 基配制物和洗劑。藥物組合物可以制備成以任何合適的方式給予，如果人類患者或護(hù)理者 任何認(rèn)為合適，則所述的藥物組合物可以包含任何傳遞助劑（包括但不限于繃帶型角膜接 觸鏡，角膜接觸鏡，formix-基移植術(shù)，眼貼或貼眼劑，壓敏貼劑或眼罩等）。在一個(gè)實(shí) 施方案中，藥物組合物基于重量（mg)/體積（ml)、或者基于重量/重量（mg)，包含含有大約 0.5%至大約4%羥乙基纖維素（HEC)的局部配制物。在多個(gè)其他的實(shí)施方案中，局部配制 物基于重量（mg) /體積（ml)、或者基于重量/重量（mg)，可以包含大約1 %至大約3 %HEC， 或者大約2%HEC。
[0123] 藥物配制物可以包含以下試劑的一種或多種：(a)冷凍干燥劑；(b)表面活性劑； (c)膨脹劑；⑷張力調(diào)節(jié)劑；（e)穩(wěn)定劑；（f)防腐劑；和/或（g)緩沖劑，例如本發(fā)明的方 法中本文所述的那些。
[0124] 所述的方法可以與適用于治療相關(guān)紊亂的其他治療聯(lián)合使用。
[0125] 所述的方法和組合物可以包括以下實(shí)施例中公開(kāi)的任何其他的實(shí)施方案。此類實(shí) 施方案可以與本發(fā)明的方法結(jié)合使用，除非內(nèi)容中明確作出其他的說(shuō)明。 實(shí)施例
[0126] 實(shí)施例1
[0127] 角膜治愈不僅對(duì)于重建保護(hù)性上皮細(xì)胞是重要的，而且對(duì)于恢復(fù)角膜透明且清晰 的視覺(jué)也是重要的。角膜治愈反應(yīng)取決于多種因素，包括：損傷的類型、大小和程度；損傷 試劑的性質(zhì)；眼睛的狀態(tài)；以及受試對(duì)象的一般狀態(tài)。最普通的角膜損傷涉及上皮細(xì)胞、前 彈力層和基質(zhì)前部的表面滲透。表面角膜缺陷可以與創(chuàng)傷或疾?。ɡ鐮I(yíng)養(yǎng)不良，神經(jīng)營(yíng) 養(yǎng)，毒性或感染的角膜炎）有關(guān)，而且還取決于手術(shù)過(guò)程，例如上皮清創(chuàng)術(shù)，光性治療性 角膜切除術(shù)，光性屈光性角膜切削術(shù)或準(zhǔn)分子激光原位磨鑲術(shù)。在所有這些情況下，不管 病因如何，主要治療目標(biāo)是促進(jìn)結(jié)構(gòu)恢復(fù)，并形成最小的瘢痕，從而提供最佳可能的視力結(jié) 果。已經(jīng)假定并描述了多種用于角膜治愈的機(jī)制，包括不同生長(zhǎng)因子、它們的調(diào)節(jié)劑和受體 的作用。不管損傷的深度如何，其顯示，角膜細(xì)胞總是與治愈過(guò)程有關(guān)，并且通過(guò)再生（不 形成纖維化）促進(jìn)治愈仍是一種挑戰(zhàn)。由于角膜的暴露位點(diǎn)和薄細(xì)性，所以角膜表面損傷 是最普通的眼科訴求，并且在患有表面損傷的患者的亞群體中，發(fā)展成復(fù)發(fā)性糜爛。本研究 的目的在于評(píng)價(jià)新的題述的藥品對(duì)角膜的上皮再形成和基質(zhì)傷口愈合的作用。
[0128] 動(dòng)物的準(zhǔn)備和稈序:
[0129] 在各過(guò)程之前，采用皮下注射鹽酸氯胺酮（50_80mg/kg)和鹽酸賽拉嗪（5_9mg/ kg)的混合物來(lái)麻醉兔子。準(zhǔn)備動(dòng)物以用于在滅菌條件下實(shí)施無(wú)菌手術(shù)。使用5%聚維酮 碘溶液清潔眶周區(qū)域，并將該溶液滴逐漸灌輸至穹窿中，而且使用眼撐保持眼瞼張開(kāi)。使用 角膜刀片（角膜刀3. 2mm)，按照與人類晶狀體乳化手術(shù)中相同的方式形成清晰的角膜全層 隧道。為了防止在角膜隧道形成后眼球塌陷，通過(guò)放液穿刺術(shù)向前房中注射少量的粘彈劑。 結(jié)膜下注射慶大霉素25mg和地塞米松2mg。手術(shù)后，給予鎮(zhèn)痛。在整個(gè)回訪期間，使用1滴 (大約50μ1)所研究的活性藥品（處于2%羥乙基纖維素的0· 03%或0· 3%Nle3A(l-7)， 處于0.05M磷酸鹽緩沖劑中，pH6. 5)對(duì)分配至處理組中的動(dòng)物進(jìn)行處理，其中所述的活性 藥品每天逐漸灌輸至結(jié)膜囊（使用點(diǎn)滴器）中。另一方面，在整個(gè)回訪期間，使用媒介物 (2%羥乙基纖維素，處于0.05M磷酸鹽緩沖劑中，pH6.5)眼睛滴劑每天對(duì)分配至對(duì)照組中 的動(dòng)物進(jìn)行處理。
[0130] 回訪檢杳:
[0131] 在動(dòng)物如上文所述處于麻醉下時(shí)，實(shí)施這些眼科回訪檢查。眼前節(jié)成像包括無(wú)紅 色的照片和眼前節(jié)焚光素成像（使用Spectralis(HeildelbergEngineering,Germany))， 其中在將一滴10%熒光素（Akorn，AbitSprings，LA)逐漸灌輸至結(jié)膜囊中并將眼球施加 輕微的壓力后，取得連續(xù)地的照片。這更常稱為Seidel檢驗(yàn)，其中將包含10%熒光素的熒 光素條帶局部施加在受影響的區(qū)域上，并使用鈷藍(lán)濾片進(jìn)行檢查。此時(shí)，熒光素顯示綠色的 顏色。熒光區(qū)域的顏色或表面的任何改變表明存在角膜滲漏。該成像數(shù)據(jù)用于評(píng)估角膜傷 口愈合的程度以及傷口滲漏的程度。使用T〇n〇pen-AVIVA(TPA，ReichertInc.)來(lái)測(cè)量眼 內(nèi)壓。
[0132] 成像和組織學(xué):
[0133] 此外，使用涉及HeidelbergRetinaTomograph(HRT)儀器對(duì)損傷進(jìn)行成像。所述 的儀器為共聚焦激光掃描檢眼鏡，其通過(guò)使用額外的顯微透鏡（其附著在標(biāo)準(zhǔn)的透鏡上） 而轉(zhuǎn)變成共聚焦角膜顯微鏡。這種額外的透鏡使HRT能夠?qū)悄?nèi)的細(xì)胞和細(xì)胞層成像， 從而允許在活著時(shí)期來(lái)評(píng)估角膜的治愈和結(jié)構(gòu)，從而詳細(xì)地觀察角膜的結(jié)構(gòu)和病理學(xué)。
[0134] 結(jié)果
[0135] 在全層損傷的兔子模型中，每天向眼睛施加Nle3-A(l_7)來(lái)減少角膜愈合的時(shí) 間，如所定義，在媒介物處理的動(dòng)物中，由第7天開(kāi)始通過(guò)Seidel檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)無(wú)滲漏，而在使 用活性藥品（2種濃度）處理的所有動(dòng)物中，到第4天開(kāi)始無(wú)滲漏。此外，通過(guò)臨床觀察，在 眼睛的測(cè)量中，炎癥/水腫降低。當(dāng)使用媒介物對(duì)動(dòng)物進(jìn)行處理時(shí)，在第7天時(shí)炎癥/水腫 持續(xù)中度狀態(tài)。在使用較低濃度的Nle3A(l-7) (0.03%)進(jìn)行處理的情況下，在第7天時(shí)水 腫極為輕微。在使用較高濃度的藥品（0. 3% )進(jìn)行處理的情況下，在手術(shù)后，僅頭5天觀察 到水腫。這顯示出這種活性化合物降低炎癥并加速角膜愈合的獨(dú)特能力。其還伴有無(wú)眼內(nèi) 壓變化以及正常的眼底檢查和熒光素血管造影法。
[0136]
[0137] 此外，還通過(guò)HRT進(jìn)行切口位點(diǎn)的評(píng)價(jià)以及組織性評(píng)價(jià)。在媒介物處理的動(dòng)物中， 在切口位點(diǎn)處，正常角膜結(jié)構(gòu)纖維化并被破壞。該觀察的代表性實(shí)例可見(jiàn)于下文的HRT圖 像中。在媒介物處理的眼睛的切口位點(diǎn)處，具有大量的纖維材料沉積，其破壞了角膜的結(jié) 構(gòu)。在使用Nle3-A(l-7)進(jìn)行處理的條件下，傷口治愈并且所述的組織具有正常的外觀和 結(jié)構(gòu)。這在尸體剖檢中被進(jìn)一步證明（第21天），此時(shí)收獲組織并將該組織準(zhǔn)備用于顯微 評(píng)價(jià)。切口位點(diǎn)的蘇木精和伊紅染色顯示在活性處理的條件下，具有正常化的結(jié)構(gòu)，并且纖 維化降低（圖1)。
[0138] 在全層角膜切口后施加0. 3 %和0. 03%Nle3_A(1-7)，與媒介物對(duì)照動(dòng)物相比，水 腫和炎癥更快速地解決，角膜傷口滲漏過(guò)程減少，以及具有正常結(jié)構(gòu)且無(wú)纖維化的治愈。更 高濃度的0. 3%Nle3-A(l-7)使得水腫和炎癥過(guò)程更短，并且在2個(gè)Nle3-A(l-7)組之間， 所有其他參數(shù)都是相等的。
[0139] 實(shí)施例2
[0140] 檢驗(yàn)原理：測(cè)定處于媒介物（2%羥乙基纖維素（HEC)，處于0. 05M磷酸鹽緩沖劑， pH6.5)中的Nle3-A(l-7)對(duì)角膜治愈的作用，其中所述的作用是通過(guò)在兔子中全層角膜 切口之后，通過(guò)斜光檢查、Seidel檢驗(yàn)、共聚焦顯微鏡和體內(nèi)滲漏壓力來(lái)測(cè)定的。
[0141] 動(dòng)物：雌性和雄性，色素性兔子（僅右眼），5只/組，重5_61bs。采用皮下注射鹽 酸氯胺酮（50-80mg/kg)和鹽酸賽拉嗪（5-9mg/kg)的混合物來(lái)麻醉兔子。準(zhǔn)備動(dòng)物以用于 在滅菌條件下實(shí)施無(wú)菌手術(shù)。使用5 %聚維酮碘溶液清潔眶周區(qū)域，并將該溶液滴逐漸灌 輸至穹窿中。使用眼撐保持眼瞼張開(kāi)。使用角膜刀片（角膜刀3. 2mm)，形成清晰的角膜全 層切口。手術(shù)后，給予鎮(zhèn)痛，然后給予檢驗(yàn)制品。在大約30分鐘至1小時(shí)后，給予抗生素油 膏。
[0142] 檢驗(yàn)和參照物質(zhì)、以及處理時(shí)間表：
[0143] 表 1
[0144]

[0145] 評(píng)價(jià)：
[0146] 表 2
[0147]
[0148] 結(jié)果
[0149] 斜光檢查：在第2天，所有動(dòng)物都具有結(jié)膜分泌物或嚴(yán)重堵塞的眼睛。在第4天， 排泄物限于0. 3%Nle3-A(l-7)組中的1只動(dòng)物、0. 03%Nle3-A(l-7)組中的1只動(dòng)物、以 及媒介物處理眼睛組中的2只動(dòng)物。在第4天，首次在0. 3%組