技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種特異檢測Ⅰ群禽腺病毒PCR檢測試劑盒及其檢測方法。所述檢測試劑盒包括:Ⅰ群禽腺病毒PCR反應(yīng)液、10×PCR?buffer?for?UNG?plus、熱啟動型DNA聚合酶、dU?plus?dNTP?mix、尿嘧啶DNA糖基化酶、陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品;其中,所述Ⅰ群禽腺病毒PCR反應(yīng)液包括:濃度為5μM的上游引物,其序列為5‘?ATGGCCAAYTTCATGCCCATGG?3’;濃度為5μM的下游引物,其序列為5‘?GTGGAAGTACTGWCKGTCGGGCCAG?3’。使用上述PCR檢測試劑盒進(jìn)行檢測時(shí),PCR擴(kuò)增反應(yīng)的條件為:25℃UNG處理10min,95℃預(yù)變性2min;98℃變性10s,55℃退火30s,72℃延伸1min,30個(gè)循環(huán);72℃延伸10min。本發(fā)明的試劑盒具有靈敏度高(稀釋到1:105仍然為陽性)、重復(fù)性好的特點(diǎn),且操作簡單、方便快捷,適合Ⅰ群禽腺病毒病的早期診斷,能夠及時(shí)滿足疾病防控的需求。
技術(shù)研發(fā)人員:羅玲;溫國元;羅青平;邵華斌;王紅琳;汪宏才;盧琴;張騰飛;艾地云;張蓉蓉;李林濤
受保護(hù)的技術(shù)使用者:湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所
文檔號碼:201611022045
技術(shù)研發(fā)日:2016.11.16
技術(shù)公布日:2017.02.22