42:423(1988);以及 Huston 等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879(1988)。
[0292] 用于人源化非人抗體（即使用來自非人抗體的⑶R)的方法也為本領(lǐng)域已知。一 般而言，人源化抗體具有來自非人來源的一個或多個氨基酸殘基。這些非人氨基酸殘基常 常被稱為引入（import)殘基，其通常取自引入可變結(jié)構(gòu)域。人源化基本上可根據(jù)Winter 及其同事的以下方法來進(jìn)行（參見例如，Jones等，Nature 321:522-525(1986) ;Riechmann 等，Nature 332:323-327 (1988) ;Verhoeyen 等，Science 239:1534-1536(1988)以及 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596(1992))，通過將嚙齒類 CDR 或 CDR序列替換為相 應(yīng)的人抗體序列。這樣的人源化抗體是嵌合抗體（美國專利第4, 816, 567號），其中來自非 人物種的相應(yīng)序列的替換顯著小于完整的人可變結(jié)構(gòu)域。事實上，人源化抗體通常是這樣 的人抗體，其中一些CDR殘基以及可能地一些FR殘基被來自嚙齒類抗體的類似位點的殘基 替換。
[0293] 在一些情況下，抗體或抗體片段可與另一個分子綴合，例如聚乙二醇（PEG 化）或血清白蛋白，以提供延長的體內(nèi)半衰期?？贵w片段的PEG化實例在以下文獻(xiàn)中 有提供：Knight 等，Platelets 15:409, 2004(阿昔單抗）；Pedley 等，Br. J. Cancer 70:1126, 1994 (抗 CEA 抗體）；Chapman 等，Nature Biotech. 17:780, 1999 ;以及 Humphreys 等，Protein Eng. Des. 20:227,2007)。還可對所述抗體或抗體片段進(jìn)行標(biāo)記或與下文描述 的治療劑綴合。
[0294] B.結(jié)合親和力
[0295] 結(jié)合的特異性可根據(jù)相比關(guān)于抗體與環(huán)境中其他物質(zhì)或整體不相關(guān)分子的解離 常數(shù)，抗體（或其他靶向部分）對靶標(biāo)的比較性解離常數(shù)（Kd)來定義。一般而言，抗體針 對不相關(guān)物質(zhì)的Kd將為其針對靶標(biāo)的Kd的至少2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、20倍、50倍、 100倍、200倍或更高倍。
[0296] 抗體期望的親和力--例如，高（pM至低nM)、中（低nM至IOOnM)或低（約IOOnM 或更高）一一可根據(jù)其是否被用作診斷劑或治療劑而存在差異。不受理論的限制，在一個實 例中，具有中親和力的抗體可比具有高親和力的抗體更成功地定位腫瘤。因此，具有不同親 和力的抗體可用于診斷用途和治療用途。
[0297] 靶向部分通常以小于約1000 nM的Kd結(jié)合，例如小于250nM、100nM、50nM、20nM或 更小的nM。在一些實施方案中，親和試劑的Kd小于15nM、10nM、5nM或InM。在一些實施方 案中，所述 Kd 為 InM 至 100nM、0.1 nM 至 50nM、0.1 nM 至 IOnM 或 InM 至 20nM。離解常數(shù)（Kd) 的值可通過公知方法來確定，并且可通過例如在Caceci等，Byte (1984) 9:340-362中公開 的方法來計算甚至復(fù)雜混合物的Kd值。
[0298] 抗體或任何靶向試劑對靶標(biāo)的親和力可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法來確定，例如， 如 Ernst 等，Determination of Equilibrium Dissociation Constants, Therapeutic Monoclonal Antibodies(Wiley 和 Sons ed.，2009)中綜述的。
[0299] 可使用定量ELISA和類似的基于陣列的親和方法。ELISA(酶聯(lián)免疫吸附信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 測定）是基于抗體的方法。在一些情況下，使對目的靶標(biāo)具有特異性的抗體貼附于基質(zhì)上， 并使其與疑似包含靶標(biāo)的樣品接觸。然后洗滌該表面以去除未結(jié)合的物質(zhì)。靶標(biāo)結(jié)合可以 多種方式來檢測，例如，使用具有經(jīng)標(biāo)記抗體的第二步驟、直接標(biāo)記靶標(biāo)或用在抗原結(jié)合后 可檢測的標(biāo)記來標(biāo)記第一抗體。在一些情況下，使抗原貼附于基質(zhì)（例如，使用對蛋白質(zhì)具 有高親和力的基質(zhì)，或鏈霉親和素-生物素相互作用），并使用經(jīng)標(biāo)記的抗體（或其他靶向 部分）對其進(jìn)行檢測。已經(jīng)開發(fā)了原始ELISA法的一些替換方法，并且這些方法是本領(lǐng)域 已知的（其綜述參見 Lequin(2005)Clin. Chem. 51:2415-18)。
[0300] KcU Kon和Koff也可通過使用表面等離子共振（SPR)來確定，例如，通過使用 Biacore TlOO 系統(tǒng)來測量。SPR 技術(shù)在 Hahnfeld 等，Determination of Kinetic Data Using SPR Biosensors, Molecular Diagnosis of Infectious Diseases (2004)中有綜 述。在典型的SPR實驗中，將一種相互作用試劑（靶標(biāo)或靶向試劑）固定于流式細(xì)胞儀中 的具有SPR活性的金包被的玻璃片上，并引入包含另一種相互作用試劑的樣品，使其流過 表面。當(dāng)將指定頻率的光照射在該表面上時，金的光學(xué)反射率的變化指示結(jié)合以及結(jié)合的 動力學(xué)。
[0301] 結(jié)合親和力還可通過將生物素化的相互作用試劑錨定于鏈霉親和素（SA)傳感器 芯片來確定。然后使另一種相互作用試劑與芯片接觸，并對其進(jìn)行檢測，例如Abdessamad 等，（2002)Nuc. Acids Res. 30:e45 中所描述的。
[0302] C.確定 CLL-I 表位
[0303] 可使用用于表位作圖的已知技術(shù)來對結(jié)合CLL-I的抗體的位點進(jìn)行作圖。本領(lǐng)域 技術(shù)人員將理解，用于表位作圖的方法可根據(jù)抗原而不同，例如，當(dāng)其表達(dá)于細(xì)胞中時，第 一多肽序列的翻譯后修飾，以及不同細(xì)胞上或不同環(huán)境中抗原結(jié)構(gòu)之間的差異。
[0304] CLL-I是具有約200個胞外氨基酸的跨膜蛋白。胞外結(jié)構(gòu)域被糖基化，并且包含C 凝集素結(jié)構(gòu)域?？赏ㄟ^改變CLL-I的初級序列或糖基化狀態(tài)，并且比較CLL-I抗體與不同 CLL-I變體的親和力來確定或部分確定CLL-I抗體的表位。
[0305] 這樣的表位作圖可在體外進(jìn)行，例如，通過篩選噬菌體展示文庫或合成肽文庫，例 如使用珠子或其他固體基質(zhì)。線性表位通常為約六個氨基酸，但是這可稍微變化。為了模擬 蛋白質(zhì)中存在的線性表位，可制得序列所對應(yīng)的合成肽。在一些實施方案中，在N端和/或 C端延伸該序列，以提供處于蛋白質(zhì)側(cè)翼序列中的額外的氨基酸殘基。這可更接近地模擬表 位的初級結(jié)構(gòu)，并且一定程度地模擬表位的二級結(jié)構(gòu)環(huán)境。此外，包含但不限于一個或多個 甘氨酸或γ氨基丁酸的殘基可附加于任一末端以提供間隔子，從而使其與例如用于免疫 測定的固相的空間相互作用最小化。常常改變間隔子的長度以根據(jù)經(jīng)驗確定最佳結(jié)構(gòu)。
[0306] 由于表位的可變性質(zhì)以及因側(cè)翼序列導(dǎo)致的潛在影響，在一些實施方案中，可使 用通過以一定數(shù)量的殘基延伸N端或C端而使得長度發(fā)生變化的肽。另一種方法利用重復(fù) 肽表位，或用介入的間隔子殘基改變表位。這些肽的長度一般根據(jù)期望的重復(fù)單元數(shù)而不 等。
[0307] -種用于表位作圖的方法是合成例如20個殘基長度的重疊肽，其具有覆蓋CLL-I 胞外區(qū)的初級序列的六個殘基。如果使用這樣的肽篩選來對表位進(jìn)行作圖，則可改造肽從 而克服與免疫測定中所使用的固相載體的不期望的相互作用。一種方法是用親水殘基替換 肽中的疏水殘基，以降低疏水相互作用或使其最小化，并且提高肽的可觸及性。類似地，可 用不帶電的殘基替換帶電的肽殘基，以消除與固相的離子相互作用。還可通過添加多種結(jié) 構(gòu)的間隔子基團(tuán)將肽表位置于離固相較遠(yuǎn)的位置并使位阻最小化，來對肽進(jìn)行修飾。
[0308] 可合成肽來反映在天然蛋白質(zhì)上或靶標(biāo)細(xì)胞上的天然蛋白質(zhì)上存在的翻譯后修 飾。修飾包括但不限于在蛋白質(zhì)的特定位點進(jìn)行糖基化和磷酸化。
[0309] 另一種用于確定表位的方法是在細(xì)胞中表達(dá)CLL-I變體，并比較不同變體之間的 CLL-I抗體親和力?？砂措难绣持兴枋龅膩碓O(shè)計CLL-I變體。此外，可替換糖基化的殘基 (例如，天冬酰胺、精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸）以確定表位是否包含糖基化位點。類似 地，可替換磷酸化的殘基（絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸）。
[0310] 還可通過比較不同類型的表達(dá)CLL-I的細(xì)胞的抗體親和力來確定或部分確定表 位。例如，可確定并比較以下細(xì)胞的抗體親和力：原代AML細(xì)胞，例如AML母細(xì)胞和移植的 AML腫瘤細(xì)胞；AML細(xì)胞系；其他非癌性骨髓細(xì)胞等。
[0311] D. CDC、ADCC 和 ADC 測定
[0312] 當(dāng)前描述的抗體對表達(dá)CLL-I的細(xì)胞的細(xì)胞依賴性細(xì)胞毒性（CDC)、抗體依賴性 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC)和抗體藥物綴合物細(xì)胞毒性（ADC)是有效的。表達(dá)CLL-I的 示例性細(xì)胞包括表達(dá)異源、重組CLL-I (例如人CLL-1)的細(xì)胞系；人AML細(xì)胞系，例如HL60、 THPl、TFl-a、U937和OCI AML-5(前四個可獲自ATCC);來自一個或多個AML患者的原代細(xì) 胞（例如PBMC細(xì)胞或移植腫瘤細(xì)胞）；人CML細(xì)胞系，例如K562和KU812(可獲自ATCC); 以及來自一名或多名CML患者或MDS患者的原代細(xì)胞。
[0313] 如果抗體造成表達(dá)該抗體靶標(biāo)的細(xì)胞受到補(bǔ)體依賴性殺傷，則該抗體被視為具有 Q)C活性并介導(dǎo)⑶C。Q)C測定是本領(lǐng)域已知的，并且在例如Gazzano-Santoro等，（1997) J. Immunol. Methods 202:163 ;Idusogie 等，（2000) J. Tmmunol. 164:4178 ;以及下文的實施 例6中有描述。CDC試劑盒和服務(wù)是市售的，例如可購自GeneScript?和Cell Technology Inc0
[0314] 簡言之，該測定通常在體外進(jìn)行，并且包括使抗體結(jié)合于在其表面上表達(dá)該抗體 靶標(biāo)的細(xì)胞。添加包括結(jié)合至抗體Ch區(qū)的Clq在內(nèi)的補(bǔ)體成分。然后補(bǔ)體成分相互作用 以殺死靶標(biāo)細(xì)胞。在一般4小時至24小時的孵育時間后，測量CDC，例如通過確定已知存在 于靶標(biāo)細(xì)胞中的胞內(nèi)酶或顆粒的釋放、通過比較起始靶標(biāo)細(xì)胞群體和終止靶標(biāo)細(xì)胞群體等 來測量。
[0315] 如果抗體導(dǎo)致結(jié)合抗體的細(xì)胞（例如表達(dá)CLL-I的細(xì)胞）受到效應(yīng)細(xì)胞的殺傷， 則該抗體被視為具有ADCC活性并介導(dǎo)ADCC。效應(yīng)細(xì)胞通常是自然殺傷細(xì)胞，但也可為 巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞或嗜酸性粒細(xì)胞。也開發(fā)了基因改造的效應(yīng)細(xì)胞系用于ADCC測 定（參見例如，Schnueriger 等，（2011)M〇1. Immunol. 48:1512)。ADCC 測定是本領(lǐng)域已知 的，并且在例如 Perussia 和 Loza (2000)Methods in Mo l.Biol. 121:179 ;Bretaudeau 和 Bonnaudet(2011)BMC Proceedings 5(Suppl 8):P63;以及下文的實施例 12 中有描述。 ADCC試劑盒和服務(wù)是市售的，例如可購自GeneScript:?和Promega?。
[0316] 簡言之，該測定通常在體外進(jìn)行，并且包括使抗體結(jié)合于在其表面上表達(dá)該抗體 靶標(biāo)的細(xì)胞。添加效應(yīng)細(xì)胞，其通常通過Fe受體如CD16來識別結(jié)合抗體的細(xì)胞。效應(yīng)細(xì) 胞通過例如釋放引起凋亡的細(xì)胞毒素來殺傷結(jié)合抗體的細(xì)胞。通過釋放靶細(xì)胞中的可檢測 元素（例如Cr51)或通過檢測細(xì)胞介導(dǎo)的毒性中涉及的元素（例如效應(yīng)細(xì)胞中NFAT信號 轉(zhuǎn)導(dǎo)的活化）來檢測細(xì)胞死亡。
[0317] 如果在與細(xì)胞毒性試劑（藥物）綴合時，抗體導(dǎo)致表達(dá)該抗體的靶標(biāo)（在本案 中為CLL-1)的細(xì)胞被殺傷（抑制存活），則該抗體被視為具有抗體-藥物綴合物（ADC) 活性（或介導(dǎo)ADC)。合適的細(xì)胞毒性試劑是本領(lǐng)域已知的，例如，皂草素、多柔比星、 道諾霉素、長春花生物堿（vinca-alkaloid)、紫杉烷類、微管蛋白試劑（例如美登素、 阿里他?。╝uristatin))和DNA試劑（例如，加利車霉素（calicheamicin)、倍癌霉素 (duocarmycin)、吡略苯并二卩丫庚因二聚體）等。ADC測定是本領(lǐng)域已知的，例如在Gerber 等，（2009)3:247以及下文的實施例中所描述的。
[0318] E.內(nèi)化
[0319] 本文描述的CLL-I抗體可內(nèi)化至包括CLL-IAML細(xì)胞在內(nèi)的表達(dá)CLL-I的細(xì)胞中。 即，表達(dá)CLL-I的細(xì)胞可內(nèi)化本文描述的抗體。本文描述的CLL-I抗體提供了用于靶向這 樣的細(xì)胞的有效方式，例如使用可檢測綴合物或細(xì)胞毒性綴合物。
[0320] 可通過使用本領(lǐng)域已知的方法來評價抗體的內(nèi)化百分比和內(nèi)化率，包括例如 流式細(xì)胞術(shù)（FACS)和共聚焦熒光顯微鏡。這樣的方法在例如Lue等，（2007)Nature Protocols(Nature Med. 13:587-96) ;Cho 等，（2010)Biomacromolecules 以及 Corbani 等 (2004)Endocrinology 145:2876-85中有描述，并且如本文中所描述。
[0321] 對于FACS和共聚焦顯微鏡，用熒光標(biāo)記的靶向試劑（例如抗體）來孵育細(xì)胞。通 常選擇細(xì)胞來表達(dá)經(jīng)標(biāo)記抗體的靶標(biāo)（例如CLL-1)。然后，可使用不表達(dá)該靶標(biāo)的對照細(xì) 胞。內(nèi)化通常發(fā)生于37°C，但不發(fā)生于4°C，這提供了該反應(yīng)的另一個對照。因此，可使細(xì) 胞與經(jīng)標(biāo)記的試劑接觸并在37°C或4°C下孵育（例如，以檢測未進(jìn)行內(nèi)化的結(jié)合）。
[0322] 通過洗滌細(xì)胞來去除未結(jié)合的試劑或表面結(jié)合的試劑，例如，在酸洗液中洗滌，然 后用正常pH的緩沖劑洗滌。
[0323] 如果使用粘附細(xì)胞，則在進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)之前從基質(zhì)移除細(xì)胞。熒光細(xì)胞的百分 比指示經(jīng)熒光標(biāo)記的試劑的內(nèi)化百分比。內(nèi)化百分比還可表示為例如添加至細(xì)胞中的初始 標(biāo)記試劑的百分比。
[0324] 試劑的內(nèi)化還可通過使用共聚焦顯微鏡定位熒光標(biāo)記的試劑來確定。使用共聚焦 顯微鏡的方法在例如Xiao等，（2008) Chem. Eur. J.，14:1769-1775中有描述。簡言之，如上 文所述，使細(xì)胞與經(jīng)標(biāo)記的試劑接觸并孵育。在孵育后，可將細(xì)胞孵育于冰上，于4°C下在 PBS緩沖劑中洗滌，用0. 25%的胰蛋白酶處理（如果適用，以除去基質(zhì)）。然后可將細(xì)胞懸液 施加于玻片上用于共聚焦熒光顯微鏡檢測。合適的共聚焦顯微鏡包括FV500-IX81共聚焦 顯微鏡（Olympus America Inc. ;Center Valley, PA)和Eclipse Ti-E (Nikon Instruments Inc. ;Melville，NY)〇
[0325] V.診斷應(yīng)用
[0326] 本文描述的CLL-1抗體特異性結(jié)合表達(dá)CLL-1的細(xì)胞。因此，CLL-1抗體可用于 體外和體內(nèi)診斷測定，以檢測表達(dá)CLL-I的細(xì)胞（例如AML細(xì)胞和AML CSC)。例如，樣品 (例如血液樣品或組織活檢樣品）可獲自患者，并將其與CLL-I抗體接觸，并且，可通過檢測 抗體結(jié)合來確定患者樣品中表達(dá)CLL-I的細(xì)胞的存在?？芍苯樱ɡ?，當(dāng)抗體本身被標(biāo)記 時）檢測或通過使用第二檢測試劑如第二抗體來檢測抗體結(jié)合。可檢測標(biāo)記可與本發(fā)明的 抗體直接相關(guān)或間接相關(guān)，例如通過螯合劑或連接子。
[0327] 在一些實施方案中，將CLL-I抗體與來自患有或疑似患有CLL-I相關(guān)疾病的個體 的生物樣品接觸，并確定抗體與樣品中的細(xì)胞的結(jié)合，其中比正?？贵w結(jié)合更高或更低指 示該個體患有CLL-I相關(guān)疾病。在一些實施方案中，所述生物樣品是血液樣品或血液級分 (例如，血清、血漿、血小板、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、PBMC)。在一些實施方案中，所述生物樣品是組 織樣品（組織活檢），例如來自疑似腫瘤部位，或來自已知受到影響的組織，以例如確定已 知腫瘤的邊界。
[0328] 通常進(jìn)行組織活檢以得到來自組織的樣品，即，非流體細(xì)胞類型。所使用的組織活 檢技術(shù)將依賴于待評價的組織類型（例如，乳腺、皮膚、結(jié)腸、前列腺、腎、肺、膀胱、淋巴結(jié)、 肝、骨髓、氣道或肺）。在癌癥的情況下，該技術(shù)還取決于腫瘤的大小和類型（例如，實體的、 懸浮的或血液的）以及其他因素。代表性的組織活檢技術(shù)包括但不限于切除活組織檢查、 切口活組織檢查、針吸活組織檢查、手術(shù)活組織檢查和骨髓活組織檢查。"切除活組織檢查" 是指去除整個腫瘤塊，其邊緣有小的環(huán)繞腫瘤的正常組織。"切口活組織檢查"是指去除包 含腫瘤截面直徑的組織楔。通過內(nèi)窺鏡或熒光鏡進(jìn)行的診斷或預(yù)后可能需要對腫瘤塊進(jìn)行 "粗針穿刺組織活檢（core-needle biopsy) "，或需要進(jìn)行"細(xì)針穿刺組織活檢"，這一般得 到來自腫瘤塊內(nèi)的細(xì)胞懸液。組織活檢技術(shù)在例如Harrison's Principles of Internal Medicine, Kasper等，eds.，第16版，2005，第70章，以及整個第V部分中有論述。
[0329] 檢測抗體結(jié)合至樣品中細(xì)胞的任何方法都可用于當(dāng)前的診斷測定。檢測抗體結(jié)合 的方法是本領(lǐng)域公知的，例如，流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡、ELISA等。在一些實施方案中，所 述方法包括制備用于確定步驟之前的檢測的生物樣品。例如，可從來自個體的樣品的其余 部分（例如，其他血液組分）分離出細(xì)胞的子群體（例如，白細(xì)胞、CD34+細(xì)胞、CD45+細(xì)胞 等），或可使組織中的細(xì)胞懸浮以便更容易檢測。
[0330] 在一些實施方案中，確定樣品中表達(dá)CLL-I的細(xì)胞的百分比，并與對照進(jìn)行比較， 所述對照例如來自已知患有CLL-I相關(guān)疾病的個體或個體組的樣品（陽性對照），或來自 已知沒有患CLL-I相關(guān)疾病的個體或個體組的樣品（正常、健康、非疾病或陰性對照）。在 一些實施方案中，所述對照是對指定組織建立的CLL-I的標(biāo)準(zhǔn)表達(dá)范圍。高于或低于表達(dá) CLL-I細(xì)胞的正常百分比，或者高于或低于表達(dá)水平，指示該個體患有CLL-I相關(guān)疾病。
[0331] 在一些實施方案中，可向個體提供（給予）經(jīng)標(biāo)記的CLL-I抗體以確定對預(yù)期治 療的適應(yīng)性。例如，可使用標(biāo)記的抗體來檢測病變區(qū)域中的CLL-I密度，其中該密度一般相 對于非病變組織較高。標(biāo)記的抗體還可指示病變區(qū)對治療是可達(dá)到的。因此，可基于成像 結(jié)果來選擇用于治療的患者。可使用標(biāo)準(zhǔn)的成像技術(shù)（例如，CT掃描、MRI、PET掃描等）來 實現(xiàn)解剖學(xué)表征，例如確定癌癥的準(zhǔn)確邊界。
[0332] 在一些實施方案中，本文所述的經(jīng)標(biāo)記的CLL-I抗體還可與治療性化合物結(jié)合， 例如形成"治療診斷性"組合物。例如，CLL-I抗體可連接（直接或間接）至可檢測標(biāo)記和 治療劑，例如，連接至細(xì)胞毒性試劑以殺傷表達(dá)CLL-I的癌細(xì)胞。在一些實施方案中，經(jīng)標(biāo) 記的CLL-I抗體用于診斷和/或定位表達(dá)CLL-I的癌細(xì)胞，然后用單獨(dú)的治療性CLL-I特 異性抗體來靶向表達(dá)CLL-I的癌細(xì)胞。在一些實施方案中，診斷性的CLL-I特異性抗體是 不以高速率或百分比內(nèi)化于表達(dá)CLL-I的細(xì)胞中的抗體。在一些實施方案中，治療性CLL-I 抗體以高速率或百分比內(nèi)化于表達(dá)CLL-I的細(xì)胞中。
[0333] A.標(biāo)記
[0334] 包含CLL-I抗體的診斷試劑可包括本領(lǐng)域已知的任何診斷試劑，例如在以下文獻(xiàn) 中所提供的：Armstrong 等，Diagnostic Imaging,第 5 版，Blackwell Publishing(2004); Torchilin, V. P. , Ed. , Targeted Delivery of Imaging Agents, CRC Press (1995)； Vallabhajosula, S. , Molecular Imaging:Radiopharmaceuticals for PET and SPECT，Springer (2009)。可通過多種方法來檢測診斷試劑，包括作為提供和/或增強(qiáng)可檢 測信號的試劑。可檢測信號包括但不限于，γ發(fā)射信號、放射性信號、回波信號、光學(xué)信號、 熒光信號、吸收信號、磁信號或斷層攝影信號。用于對診斷試劑成像的技術(shù)可包括但不限于 單光子發(fā)射計算機(jī)斷層攝影（SPECT)、磁共振成像（MRI)、光學(xué)成像、正電子發(fā)射斷層攝影 (PET)、計算機(jī)斷層攝影（CT)、χ-射線成像、γ射線成像等。術(shù)語"可檢測試劑"、"可檢測部 分"、"標(biāo)記"、"成像試劑"和類似術(shù)語在本文中同義使用。
[0335] 在一些實施方案中，所述標(biāo)記可包括光學(xué)試劑，例如焚光劑、磷光劑、化學(xué)發(fā)光試 劑等。許多試劑（例如，染料、探針、標(biāo)記或指示劑）是本領(lǐng)域已知的，并且可用于本發(fā)明。 (參見例如，Invitrogen, The Handbook-A Guide to Fluorescent Probes and Labeling Technologies,第10版（2005))。焚光劑可包括多種有機(jī)和/或無機(jī)小分子，或多種焚光蛋 白及其衍生物。例如，熒光劑可包括但不限于菁、酞菁、撲啉、吲哚菁、羅丹明、吩嗪、苯基咕 噸、吩噻嘆、吩硒嘆、焚光素、苯并卟啉、方酸菁（squaraine)、二P比略喃啶酮、并四苯、喹啉、 P比嘆、咕啉、克酮鐵（cr〇conium)、吖啶酮、菲啶、羅丹明、叮啶、蒽醌、氧族P比喃鐵類似物、二 氫卟酷、萘菁（naphthalocyanine)、次甲基染料、吲噪鐵染料、偶氮化合物、甘菊藍(lán)、氮雜甘 菊藍(lán)、三苯基甲烷染料、剛B朵、苯并剛哚、剛噪羰菁、苯并剛哚羰菁和B0DIPY?衍生物。熒光 染料在例如美國專利第4, 452, 720號、美國專利第5, 227, 487號和美國專利第5, 543, 295 號中有描述。
[0336] 所述標(biāo)記也可為放射性同位素，例如，發(fā)射Y射線、正電子、β粒子和α粒子 以及X射線的放射性核素。合適的放射性核素包括但不限于 225Ac、72AS、211At、nB、 128Ba、 212Bi,75Br,77Br, 14C,109Cd,62Cu,64Cu,67Cu, 18F,67Ga,68Ga,3H,166Ho, 1231,1241,1251,1301, 131 1,111 In, 177Lu、13N、150、32P、 33P、212Pb、103Pd、186Re、188Re、 47Sc、153Sm、89Sr、99D1Tc、88Y 和 90Y。在一些實施 方案中，放射性試劑可包括 niIn-DTPA、99niTc(C0)