, 29. 0, 28. 0, 27. 8, 26. 5, 25. 9, 24. 5, 23. 6, 23. 5, 18. 2, 17. 4, 16. 8, 15. 3〇
[0053] 實(shí)施例2制備衍生物CHA-3
[0054]
[0055] 將實(shí)施例1中步驟c所得產(chǎn)物齊墩果酸-3-0- (2, 3, 4, 6-四-0-苯甲酰 基-0 -D-吡喃葡萄糖苷）（0-3) (500mg, 0. 488mmol)溶于5mL干燥的二氯甲燒中，加入 EDCI(140mg, 0? 732mmol)和H0BT(98. 8mg, 0? 732mmol)室溫下攪拌 2h后，于冰浴下滴加環(huán)己 胺（1. 64_〇1)，室溫下繼續(xù)反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，依次用0. 1N稀鹽酸、飽和碳酸氫 鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾，減壓蒸干，再溶于5mL干燥甲 醇和二氯甲燒（v/v= 3:1)中，加入0. 8mL甲醇鈉甲醇（lmol/L)溶液，室溫反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié) 束后使用732型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂調(diào)PH至中性，抽濾蒸干。經(jīng)硅膠柱層析（二氯甲烷：甲醇= 15:1)純化，得到白色粉末N-環(huán)己基-齊墩果酸-3-0- 0 -D-吡喃葡萄糖苷（CHA-3) 209mg， 兩步收率42%。
[0056] ESI-MSC42H69NNa07m/z: 722. 7500 [M+Na]+。iH-NMR(600Hz，pyridine-d5) 8 ： 5. 26 (s, 1H), 4. 73 (d,J= 9. 6Hz, 1H), 4. 37 (m, 1H), 4. 20 (m, 1H), 4. 01 (m, 1H), 3. 82 (m, 1H ),3. 78 (m, 1H), 3. 19 (m, 1H), 2. 88(brd,J= 10. 2Hz, 1H), 1. 14 (s, 3H), 1. 03 (s, 3H), 0. 81 (s, 3H), 0? 77 (s, 3H)，0? 71 (d,J= 2. 4Hz, 6H)，0? 61 (s, 3H) ? 13C-NMR(150Hz,pyridine-d5)S: 176 .4, 145. 0, 122. 6, 106. 9, 88. 7, 78. 7, 78. 3, 75. 8, 71. 9, 63. 1, 55. 8, 48. 5, 47. 9, 46. 8, 46. 3, 4 2. 3, 42. 0, 39. 8, 39. 6, 38. 7, 37. 0, 34. 4, 33. 9, 33. 5, 33. 2, 32. 9, 30. 8, 28. 2, 27. 8, 26. 5, 26. 0, 25. 9, 25. 5, 25. 4, 23. 8, 23. 7, 23. 6, 18. 5, 17. 8, 17. 0, 15. 5.
[0057] 實(shí)施例3制備衍生物CHA-5
[0058]
[0059] 1)半乳糖三氯乙酰亞胺酯的制備與實(shí)施例1中葡萄糖三氯乙酰亞胺酯的制備方 法相似冰水浴下，將D-半乳糖（5. 0g，27. 7mmol)溶于100mL干燥P比啶中，加入苯甲酰氯 (19. 3mL，166. 5mmol)，室溫下攪拌反應(yīng)18h，加水60mL破壞過(guò)量的苯甲酰氯，以乙酸乙酯提 取，合并有機(jī)相，順次用水、稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉洗，無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，濾液濃縮得全 苯甲?；肴樘?5. 9g。將上步所得的全苯甲?；肴樘?. 0g溶于干燥的二氯甲烷40mL 中，滴加12mLHBr-HOAc，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，lh反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液順次用飽和碳酸氫鈉溶液、 鹽水洗滌，有機(jī)層濃縮至干，得到半乳糖端位溴代產(chǎn)物。將半乳糖端位溴代產(chǎn)物加入到丙酮 25mL和lmL蒸餾水中溶解，于室溫下加入氧化銀2. 0g，攪拌2h后過(guò)濾除去固體，濾液濃縮 后得白色固體。再將白色固體2. 0g加入到二氯甲烷10mL中溶解，并加入三氯乙腈1.9mL 和二氮雜二環(huán)（DBU)0.2mL，冰浴下反應(yīng)4h，減壓蒸除溶劑，殘余物經(jīng)加壓柱層析（石油醚： 乙酸乙酯=8:1)得到白色固體半乳糖三氯乙酰亞胺酯3. 3g，總收率65%。
[0060] 2)烏蘇酸芐酯的合成
[0061] 將烏蘇酸（5. 0g，10. 9mmol)溶于175mL二氯甲烷中，加入四丁基溴化銨0. 4g，和溶 于28mL水中的3. 7g碳酸鉀水溶液，滴加溴芐1. 6mL，過(guò)夜反應(yīng)，得到白色無(wú)定形固體烏蘇酸 芐酯4. 7g，收率83%。
[0062] 3)烏蘇酸芐酯-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯甲?；?D-吡喃半乳糖苷）的合成
[0063] 將上一步所得烏蘇酸芐酯（1.lg，2.Ommol)和半乳糖三氯乙酰亞胺酯 (1. 94g，2. 6mmol)溶于干燥二氯甲燒20mL，加入4表分子篩，室溫下攪拌30min。加 入TMSOTf(19. 4yL，0.lmmol)，繼續(xù)攪拌至薄層監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束。加三乙胺0. 4mL淬滅 反應(yīng)，過(guò)濾，濾液濃縮，硅膠柱層析（石油醚：乙酸乙酯=10:1)，得白色固體烏蘇酸芐 酯-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯甲酰基-D-吡喃半乳糖苷）1. 8g，收率88%。
[0064] 4)烏蘇酸-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯甲?；?D-吡喃半乳糖苷）的合成
[0065] 將上一步所得產(chǎn)物烏蘇酸芐酯-3-0- (2, 3, 4, 6-四-0-苯甲?；?-D-吡喃半乳 糖苷）1. 2g溶于25mL乙酸乙酯中，加入10 %Pd-C8. 8mg，攪拌下通氫氣并加熱回流。待TLC 檢測(cè)顯示反應(yīng)已經(jīng)完成，過(guò)濾，濾液濃縮干燥得白色固體烏蘇酸-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯 甲酰基-0 -D-吡喃半乳糖苷）1.lg，收率92%。
[0066] 5)N-芐基-烏蘇酸-3-0- 0 -D-吡喃半乳糖苷的合成
[0067] 將上一步所得產(chǎn)物烏蘇酸-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯甲?；?D-吡喃半乳糖 苷）（50011^，0.4881111]1〇1)溶于51111^干燥的二氯甲燒中，加入￡0(]1(14011^，0.7321111]1〇1)和 H0BT(98. 8mg，0. 732mmol)室溫下攪拌2h后，于冰浴下滴加芐胺（1. 64mmol)，室溫下繼續(xù)反 應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，依次用0. 1N稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液 洗，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾，減壓蒸干，再溶于5mL干燥甲醇和二氯甲烷（v/v= 3:1) 中，加入0. 8mL甲醇鈉甲醇（lmol/L)溶液，室溫反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后使用732型陽(yáng)離子交 換樹(shù)脂調(diào)PH至中性，抽濾蒸干。經(jīng)硅膠柱層析（二氯甲烷：甲醇=12:1)純化，得到白色 粉末N-芐基-烏蘇酸-3-0- 0 -D-吡喃半乳糖苷252mg，兩步收率73 %。
[0068]ESI-MSC43H65NNa07m/z:730. 4659 [M+Na]+〇 'H-NMR(600Hz,pyridine-d5) 8 ：7. 26(d, 2H,J= 9. 0Hz), 7. 13 (t,J= 9. 0Hz, 9. 0Hz, 2H), 7. 05 (t,J= 9. 0Hz, 7. 8Hz, 1H), 5. 20 (s, 1H), 4. 66 (d, 1H,J= 9. 0Hz), 4. 51 (m, 1H), 4. 36 (m, 1H), 4. 25 (m, 1H), 4. 40 ( m, 2H), 3. 95(dd,J= 4. 2Hz, 11. 4Hz, 1H), 3. 89 (t,J= 7. 2Hz, 7. 2Hz, 1H), 3. 21 (dd,J= 4. 2Hz, 11.4Hz, 1H),2. 22(brd,J= 10. 8Hz, 1H), 1. 10(s, 3H), 1. 01 (s, 3H), 0. 77 (s, 3H), 0. 74 (d,J= 7. 2Hz, 3H), 0. 72 (s, 3H), 0. 68 (s, 3H), 0. 66 (s, 3H). 13C-NMR(150Hz,pyridine-d5) 8 ： 177. 3, 140. 5, 139. 5, 128. 7, 128. 1, 127. 2, 125. 8, 107. 6, 88. 7, 76. 8, 75. 4, 73. 1, 70. 3, 6 2. 5, 55. 8, 53. 5, 47. 9, 47. 8, 43. 5, 42. 5, 40. 0, 39. 8, 39. 5, 39. 2, 38. 9, 38. 1, 36. 9, 33. 4, 31. 2, 28. 3, 28. 3, 26. 7, 24. 8, 23. 8, 23. 6, 21. 3, 18. 4, 17. 5, 17. 4, 17. 0, 15. 6.
[0069] 6)N-芐基-烏蘇酸-3-0- -D-吡喃半乳糖醛酸苷（CHA-5)的合成
[0070] 將上一步所得產(chǎn)物N-芐基-烏蘇酸-3-0- -D-吡喃半乳糖苷（141mg, 0? 2mmol) 溶于5mL的THF中，加入TEMP0(0. 65mg，4ymol)攪拌溶解，依次加入飽和碳酸氫鈉水溶 液5mL，以及溴化鉀（4mg, 0? 04mmol)，四丁基溴化銨（4. 7mg, 0? 04mmol)，此時(shí)PH維持在 9. 5左右。在冰浴下，加入次氯酸鈣（0.4mmol)，冰浴下攪拌反應(yīng)5h，加入乙醇淬滅反應(yīng)， 加入5mL水?dāng)嚢?，抽濾，水洗，得白色粉末N-芐基-烏蘇酸-3-0- 0 -D-吡喃半乳糖醛酸苷 (CHA-5)56.lmg，收率 39%。
[0071]ESI-MSC43H64NNa08m/z: 759. 4788 [M+Na]+〇
[0072] 'H-NMRCeOOHz,pyridine-d5) 8 ：7. 35(d,J= 9. 0Hz, 2H) , 7. 13(t,J= 9. 0Hz, 2H), 7. 05 (t,J= 9. 0Hz, 7. 8Hz, 1H), 5. 21 (s, 1H), 4. 62 (d, 1H,J= 8. 4Hz), 4. 32 (m, 1H), 4. 11 (m, 1H), 3. 89 (m, 1H), 3. 62 (m, 1H), 3. 73(brs, 1H), 3. 23 (dd,J= 4. 2Hz, 12. 0Hz)，2. 21(brd, 1H,J= 13. 2Hz)，1. 09 (s, 3H), 1. 00 (s, 3H)，0? 78 (s, 3H)，0? 73(s ,3H), 0. 70 (s, 3H), 0. 69 (s, 3H), 0. 65 (s, 3H). 13C-NMR(150Hz,pyridine-d5) 8 ： 176. 8, 175. 3 ,140. 0, 139. 0, 128. 2, 128. 2, 127. 6, 125. 3, 107. 1, 88. 2, 76. 3, 74. 9, 72. 6, 69. 8, 55. 3, 53. 0 ,47. 4, 47. 3, 43. 0, 42. 0, 39. 4, 39. 3, 39. 0, 38. 7, 38. 4, 37. 6, 36. 4, 32. 9, 30. 7, 27. 8, 27. 8, 2 6. 2, 24. 3, 23. 3, 23. 1，20. 8, 17. 9, 17. 0, 16. 9, 16. 5, 15. 1。
[0073] 實(shí)施例4制備衍生物CHA-4和CHA-7
[0074]
[0075]N-炔丙基-烏蘇酸-3-0- 0 -D-吡喃半乳糖苷（CHA-7)的合成
[0076] 將實(shí)施例3中步驟4)所得產(chǎn)物烏蘇酸-3-0-(2, 3, 4, 6-四-0-苯甲酰 基-0 -D-吡喃半乳糖苷）（500mg, 0. 488mmol)溶于5mL干燥的二氯甲燒中，加入 EDCI(140mg，0? 732mmol)和H0BT(98. 8mg，0? 732mmol)室溫下攪拌 2h后，于冰浴下滴加炔丙 胺（1. 64_〇1)，室溫下繼續(xù)反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，依次用0. 1N稀鹽酸、飽和碳酸氫 鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾，減壓蒸干，再溶于5mL干燥甲 醇和二氯甲燒（v/v= 3:1)中，加入0. 8mL甲醇鈉甲醇（lmol/L)溶液，室溫反應(yīng)6h。反應(yīng) 結(jié)束后使用732型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂調(diào)PH至中性，抽濾蒸干。經(jīng)硅膠柱層析（二氯甲烷：甲 醇=12:1)純化，得到白色粉末N-炔丙基-烏蘇酸-3-0-0-D-吡喃半乳糖苷215mg，兩步 收率67%。
[0077] ESI-MSC39H61N07m/z:655. 5095 [M+H]+〇4-麗1?(600Hz，pyridine_d5) 8:5.22 (s, 1H), 4. 66 (d,J= 7. 8Hz, 1H), 4. 37 (m, 2H), 4. 26 (m, 2H), 4. 11-4. 07 (m, 2H), 3. 96-3. 90 (m, 2H), 3. 20 (dd,J = 4. 2Hz, 12. 0Hz, 1H), 2. 88 (t,J= 2. 4Hz, 1H), 2. 25 (d,J= 11. 4Hz, 1H), 1. 10 (s, 3H), 1. 00 (s, 3H), 0. 79 (s, 6H), 0. 76 (s, 3H), 0. 73 (d,J= 6. 6Hz, 3H), 0 .71 (s, 3H), 0. 66 (s, 3H). 13C-NMR(150Hz,Pyr) 8 ： 177. 1, 139. 3, 125. 9, 107. 6, 88. 8, 82. 0, 76 .8, 75. 4, 73. 1, 71. 9, 70. 3, 62. 5, 55. 8, 53. 2, 47. 9, 47. 8, 42. 4, 40. 0, 39. 7, 39. 5, 39. 3, 38. 9 ,37. 8, 36. 8, 33. 3, 31. 0, 29. 1, 28. 3, 28. 2, 26. 5, 24. 7, 23. 7, 23. 5, 21. 3, 18. 3, 17. 3, 17. 4, 1 7. 1, 15. 5.
[0078]N-炔丙基-烏蘇酸-3-0- 0 -D-吡喃半乳糖醛酸苷（CHA-4)的合成
[0079] 將上一步所得產(chǎn)物N-炔丙基-烏蘇酸-3-0-0-D-吡喃半乳糖苷 (131mg, 0? 2mmol)溶于5mL的THF中，加入TEMP0(0. 65mg, 4ymol)攪拌溶解，依次加入飽 和碳酸氫鈉水溶液5mL，以及溴化鉀（4mg, 0. 04mmol)，四丁基溴化銨（4. 7mg, 0. 04mmol)，此 時(shí)PH維持在9. 5左右。在冰浴下，加入次氯酸鈣（0. 4mmol)，冰浴下攪拌反應(yīng)5h，加入乙醇 淬滅反應(yīng)，加入5mL水?dāng)嚢?，抽濾，水洗，得白色粉末N-炔丙基-3-0-[ 0-D-吡喃半乳糖醛 酸]-烏蘇酸苷（CHA-5) 54. 9mg，收率41 %。
[0080] ESI-MSC39H59N0sm/z: 669. 4468 [M+H]+〇i-NMR(600Hz,pyridine-d5) 8 ： 5. 12 (s,