水性梔子苷假 模版分子印跡聚合物；
[0044] 其中，步驟（1)中，所述的假模板為京尼平苷、京尼平苷酸、馬錢苷和莫諾苷，優(yōu)選 為京尼平苷；功能單體為烯基苷型功能單體；交聯(lián)劑為N，N-亞甲基二丙烯酰胺；致孔劑為 去離子水；引發(fā)劑為偶氮二異戊腈或偶氮二異丁腈，優(yōu)選為偶氮二異丁腈。優(yōu)選上述步驟 4)得到的聚合物研磨過150~200目篩，除去模板分子用酸洗液為體積分數(shù)10%~20%的 乙酸乙醇溶液。
[0045] 本發(fā)明還提供了上述用于檢測梔子苷含量的親水性分子印跡聚合物在中藥復方 制劑質(zhì)量控制中的應用，其特征在于，包括如下步驟：以上述的用于純化富集梔子苷的分子 印跡聚合物作柱層析填料裝柱，然后用中藥復方制劑提取液上柱，再用體積比為10 :1的環(huán) 己烷/醇混合溶液淋洗，最后層析柱用醇洗脫，流出液為梔子苷及其結(jié)構(gòu)類似物。所述的醇 為乙醇、異丙醇、正丙醇或正丁醇。對照品為用50%甲醇制成的每lmL含30 μ g梔子苷的溶 液。梔子苷假模板分子印跡聚合物的再生重復利用：將分子印跡聚合物用95%乙醇洗脫后 即可再生用于下一次純化富集用。
[0046] 本發(fā)明的有益效果：
[0047] (1)本發(fā)明合成了一種適用于水相中印跡的親水性功能單體。
[0048] (2)本發(fā)明首次以親水性功能單體、在水相中制備梔子苷假模板制備分子印跡聚 合物，與傳統(tǒng)脂溶性功能單體制備的分子印跡聚合物相比水相中制備的聚合物具有良好親 水性，在水介質(zhì)中具有更好的吸附性能。
[0049] (3)本發(fā)明采用"假模板"分子印跡技術(shù)。分子印跡聚合物交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)緊密，若采用 真實模板分子梔子苷制備聚合物，雖經(jīng)過脫除模板分子過程，但包裹在聚合物中的梔子苷 在樣品進行固相萃取純化富集時容易泄露出來，嚴重影響分析方法的準確性。因此，本發(fā)明 采用假模版分子印跡技術(shù)制備聚合物。
[0050] (4)本發(fā)明提供的制備親水性分子印跡聚合物方法操作簡便、再生方法簡單、重復 利用率高。
[0051] (5)本發(fā)明制備的親水性分子印跡聚合物用作柱層析填料，實現(xiàn)對基質(zhì)復雜中藥 制劑提取液進行前處理，建立一種新型的樣品前處理分析方法。
【附圖說明】
[0052] 圖1是本發(fā)明的親水性分子印跡聚合物的制備過程及其在中藥成方制劑樣品前 處理中的應用流程圖；
[0053] 圖2是本發(fā)明合成的烯基苷型功能單體的過程及結(jié)構(gòu)式；
[0054] 圖3是實施例1上柱所用的樣品粗提液液相色譜圖，即未經(jīng)分子印跡-固相萃取 柱預處理的樣品液相色譜圖；
[0055] 圖4是實施例1制得的洗脫液高效液相色譜圖，即經(jīng)分子印跡-固相萃取柱純化 富集梔子苷及其結(jié)構(gòu)類似物之后的液相色譜圖；
[0056] 圖5是本發(fā)明中使用的假模版分子結(jié)構(gòu)式。
【具體實施方式】
[0057] 下面結(jié)合附圖與實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0058] 實施例1
[0059] 親水性功能單體的合成：
[0060] 將150g丙烯醇加入反應釜中，冰浴下在反應釜中逐滴加入20g乙酰氯，充分攪拌1 小時，將反應釜升溫加熱，分批加入12g無水葡萄糖，繼續(xù)加熱直至回流。反應結(jié)束后反應 液用碳酸氫鈉調(diào)pH = 6~7,抽濾除去不溶物后將濾液旋干，得到油狀物。柱色譜分離，得 到產(chǎn)物6. 9g。
[0061] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物的制備：
[0062] (1)備料
[0063] 各原料組分按如下用量配比配料：假模板分子京尼平苷0. 91g，烯基苷型功能單 體1. 98g，交聯(lián)劑N，N-亞甲基二丙烯酰胺16. 17g，引發(fā)劑偶氮二異丁腈0. 08g，制孔劑去離 子水 55. 31g ;
[0064] (2)制備帶有假模板分子的分子印跡聚合物
[0065] 將上述備好的京尼平苷、烯基苷型功能單體、N，N-亞甲基二丙烯酰胺、偶氮二異丁 腈、去離子水加入到反應釜中混合均勻，超聲脫氣15min，然后充氮除氧15分鐘，密封后于 60°C恒溫油浴聚合24小時，得到帶有假模板分子的聚合物；
[0066] (3)制備脫去假模板分子的分子印跡聚合物
[0067] 將上述制備的聚合物碾磨過200目篩，即得到帶有假模板分子的聚合物顆粒，用 乙酸體積分數(shù)為10%的乙醇溶液洗脫，于60°C真空干燥后，得到分子印跡聚合物17. lg。
[0068] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物在純化富集梔子苷中的應用：
[0069] 取10g本實例制得的分子印跡聚合物裝柱，稱取梔子金花丸lg粉碎，加入25mL去 離子水加熱回流提取2小時，過濾，殘渣重復提取3次，收集濾液混勻后上柱。待上柱溶液 流盡后，用環(huán)己烷/乙醇（10 :l，v/V)進行淋洗，得淋洗液。層析柱再用乙醇洗脫，高效液相 色譜圖如圖4所示，說明分子印跡-固相萃取對梔子苷有較好純化富集效效果。結(jié)果表明， 由本發(fā)明建立的方法得到的梔子苷的回收率為82. 9%~91. 3%，精密度用RSD表示，小于 2. 8%。測定的線性范圍為0.5~10.0 mg/g。被分析的梔子金花丸樣品中梔子苷的檢出限 為0. 03~0. llmg/g。依據(jù)2015版中國規(guī)定，lg梔子金花丸中含梔子苷不得少于2. 8mg，而 測定的樣品中梔子苷含量為3. lmg，符合藥典標準。
[0070] 實施例2
[0071] 親水性功能單體的合成同實施例1。
[0072] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物的制備：
[0073] 各原料組分按如下用量配比配料：假模板分子京尼平苷0. 99g，烯基苷型功能單 體2. llg，交聯(lián)劑N，N-亞甲基二丙烯酰胺17. 26g，引發(fā)劑偶氮二異丁腈0. 09g，制孔劑去離 子水55. 47g。制備分子印跡過程同實施例1，最后得到分子印跡聚合物19. 3g。
[0074] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物在純化富集梔子苷中的應用：
[0075] 取10g本實例制得的分子印跡聚合物裝柱，稱取清火梔麥丸lg粉碎，加入25mL去 離子水加熱回流提取2小時，過濾，殘渣重復提取3次，收集濾液混勻后上柱。待上柱溶液 流盡后，用環(huán)己烷/乙醇（10 :l，v/V)進行淋洗，得淋洗液。層析柱再用乙醇洗脫。結(jié)果表 明，由本發(fā)明建立的方法得到的梔子苷的回收率83. 9 %~92. 3 %，精密度用RSD表示，小于 2. 6%。測定的線性范圍為0.5~10.0 mg/g。被分析的清火梔麥丸樣品中梔子苷的檢出限 為0. 03~0. 15mg/g。依據(jù)2015版中國規(guī)定，lg清火梔麥丸中含梔子苷不得少于3. 8mg，而 測定的樣品中梔子苷含量為4. Omg，符合藥典標準。
[0076] 實施例3
[0077] 親水性功能單體的合成同實施例1。
[0078] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物的制備：
[0079] 各原料組分按如下用量配比配料：假模板分子京尼平苷1. 03g，烯基苷型功能單 體2. 22g，交聯(lián)劑N，N-亞甲基二丙烯酰胺16. 26g，引發(fā)劑偶氮二異戊腈0. 10g，制孔劑去離 子水53. 33g。制備分子印跡過程同實施例1，最后得到分子印跡聚合物15. 7g。
[0080] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物在純化富集梔子苷中的應用：
[0081] 取10g本實例制得的分子印跡聚合物裝柱，稱取茵梔黃顆粒3g粉碎，加入50mL去 離子水加熱回流提取2小時，過濾，殘渣重復提取3次，收集濾液混勻后上柱。待上柱溶液 流盡后，用環(huán)己烷/乙醇（10 :l，v/V)進行淋洗，得淋洗液。層析柱再用乙醇洗脫。結(jié)果表 明，由本發(fā)明建立的方法得到的梔子苷的回收率82. 6%~91. 7%，精密度用RSD表示，小于 2. 9%。測定的線性范圍為0.5~10. 0mg/g。被分析的茵梔黃顆粒樣品中梔子苷的檢出限 為0. 04~0. 16mg/g。依據(jù)2015版中國規(guī)定，3g茵梔黃顆粒中含梔子苷不得少于3. Omg，而 測定的樣品中梔子苷含量為3. 2mg，符合藥典標準。
[0082] 實施例4
[0083] 親水性功能單體的合成同實施例1。
[0084] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物的制備：
[0085] 各原料組分按如下用量配比配料：假模板分子京尼平苷1. 18g，烯基苷型功能單 體2. 45g，交聯(lián)劑N，N-亞甲基二丙烯酰胺17. 59g，引發(fā)劑偶氮二異丁腈0. llg，制孔劑去離 子水65. 03g。制備分子印跡過程同實施例1，最后得到分子印跡聚合物18. 2g。
[0086] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物在純化富集梔子苷中的應用：
[0087] 取10g本實例制得的分子印跡聚合物裝柱，稱取清開靈顆粒1. 5g粉碎，加入30mL 去離子水加熱回流提取2小時，過濾，殘渣重復提取3次，收集濾液混勻后上柱。待上柱溶液 流盡后，用環(huán)己烷/乙醇（10 :l，v/V)進行淋洗，得淋洗液。層析柱再用乙醇洗脫。結(jié)果表 明，由本發(fā)明建立的方法得到的梔子苷的回收率82. 2%~92. 7%，精密度用RSD表示，小于 2.5%。測定的線性范圍為0.5~10. 0mg/g。被分析的清開靈顆粒樣品中梔子苷的檢出限 為0. 03~0. 17mg/g。依據(jù)2015版中國規(guī)定，1. 5g清開靈顆粒中含梔子苷不得少于1. Omg， 而測定的樣品中梔子苷含量為1. 2mg，符合藥典標準。
[0088] 實施例5
[0089] 親水性功能單體合成同實施例1。
[0090] 親水性梔子苷假模板分子印跡聚合物的制備：
[0091] 各原料組分按如下用量配比配料：假模板分子京尼平苷酸0. 89g，烯基苷型功能 單體1. 91g，交聯(lián)劑N，N-亞甲基二丙烯酰胺16.