技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種數(shù)字化單分子電化學檢測堿性磷酸酶的方法。單個堿性磷酸酶（ALP）催化其底物對氨基磷酸酚（p?APP）產(chǎn)生還原性的對氨基苯酚（p?AP），p?AP可立即將Ag+還原成Ag0沉積到微電極表面，最后通過金屬溶出伏安法得到電信號。本發(fā)明利用軟光刻技術(shù)構(gòu)建了彼此獨立的納米金微電極陣列，用于數(shù)字化分析的高通量平行實驗。通過稀釋酶濃度和控制反應(yīng)液體積，保證每個微電極中至多含有單個酶分子，從而實現(xiàn)堿性磷酸酶的單分子檢測。通過數(shù)字化分析的結(jié)合，ALP的檢出限從50?aM降到1?aM，有效地提高了方法的靈敏性和可靠性，并成功用于肝癌細胞這一復(fù)雜體系中ALP的檢測。該方法在探究分子的物理化學性質(zhì)、單個生物分子檢測及單細胞分析中有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：張志凌;伍珍;龐代文
受保護的技術(shù)使用者：武漢大學
文檔號碼：201610643262
技術(shù)研發(fā)日：2016.08.08
技術(shù)公布日：2017.01.11